北方伟业计量集团有限公司
最窄的峰宽,最佳的柱效,可以由范德姆特方程确定。
在色谱里,用理论塔板数N和理论塔板高度H来评价色谱柱的分离效果,也就是柱效(column efficiency)。
范德姆特方程:H=A+B/V+C*V
其中:V表示流动相的流速,A, B, C代表影响峰宽的三个因素。
(1)A代表涡流扩散速度,是由于色谱柱粒径不均匀引起的。
减小影响方式:选用粒径更小,更均匀的颗粒来填充柱子。
(2)纵向分子扩散(molecular diffusion),对应范式方程的B/V项。会造成峰宽更宽。
减小影响方式:提高流动相的流速V,并且选用比较窄的柱子。
(3)不同的滞留引起的扩散被称为传质阻力(molecular diffusion),是范式方程的C*V项。
减小影响方式:选用更小粒径的填充材料,降低流动相的流速V。
综上,第一项与流速无关,和色谱柱的规格和填料的均匀程度有关。
第二项纵向分子扩散,是和色谱柱内径以及流动相的流速相关。
而第三项传质阻力,和填料的粒径大小以及流动相流速都有关。
后两项和速度的关系正好相反,这就需要找到一个最优的速度,使总的数值是最小的。
在色谱柱确定,也就是A,B,C项确定的情况下,我们可以通过计算来得到这个最佳流速的值。
通过这个公式,可以计算出经典的4.6mm直径,5um粒径的柱子最佳流速恰好就是1ml/min。
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