高效液相色谱-串联质谱法测定莱芜香肠中3种β-受体激动剂残留（一）

为建立一种快速测定莱芜香肠中盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等3种β-受体激动剂残留量的液质联用检测方法，将样品加入乙酸铵溶液，经β-葡糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶水解以及固相萃取柱净化后，以甲醇-0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾离子源，以多反应监测方式进行采集，外标法定量。结果显示，3种β-受体激动剂在0.5～50.0 ng/mL范围内线性关系良好（R2≥0.999 6）；该方法检出限均为0.25μg/kg，平均回收率为90%～110%，相对标准偏差为0.1%～2.0%。该方法优化了盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇的仪器分析条件，操作方便、结果准确、重现性好、回收率高，能满足莱芜香肠中食品安全控制检测的需要。

莱芜香肠旧称“南肠”，是饮誉山东省内外的传统名吃，在莱芜有“肴上肴”美称。莱芜香肠以“莱芜黑”猪肉或精选猪肉为主要原料，制作精良，并耐储存。

克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇都属于苯乙醇胺类，其中克伦特罗属于苯胺型，莱克多巴胺、沙丁胺醇属于苯酚型。它们都属于β-受体激动剂，俗称“瘦肉精”。将“瘦肉精”添加于饲料中，可促进蛋白质合成，加速脂肪转化和分解，从而明显提高脂肪型动物瘦肉率。“瘦肉精”在动物体内残留时间较长，短期内残留量较大，可通过食物链进入人体，给消费者身体健康带来危害。我国明确禁止使用β-受体激动剂，然而受经济利益驱使，其滥用仍然禁而不止。动物源性食品中违禁药物残留已成为世界范围内的食品卫生难题，因此研究快速测定克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇残留量检测方法具有十分重要的意义。

目前，β-受体激动剂检测方法主要有高效液相色谱（HPLC)、气质联用（GC-MS)、液质联用（LC-MS)、放射免疫（RIA)和酶联免疫吸附测定（ELISA)。其中GC-MS和HPLC法样品前处理过程较为繁琐、检测灵度低，且GC-MS法需要衍生化；ELISA法假阳性率较高；而LC-MS法能实现多种β-受体激动剂同时检测，具有高通量、高效等优点。以往药物残留研究对象主要集中于猪、牛、羊的鲜肉、肝脏及尿液等，对于肉制品则未见报道。本研究针对克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等3种β-受体激动剂，首次以莱芜香肠为对象，建立快速简便、专属性强、灵敏度高的LC-MS/MS方法。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

1.1.1 标准品与试剂

盐酸克伦特罗标准物质（纯度98.5%）、莱克多巴胺标准物质（纯度95.5%）、沙丁胺醇标准物质（纯度99.0%），购自农业农村部环境保护监测所；HLB固相萃取柱（6 m L/500 mg）、MCX固相萃取柱（3 m L/60 mg），为美国Waters公司产品；β-葡糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶，为美国Sigma公司产品；甲醇（色谱纯）、甲酸（色谱纯），为德国Merck公司产品；氨水（分析纯）、乙酸铵（分析纯）、高氯酸（分析纯），购自国药集团化学试剂有限公司；Thermo scientific 25002-052130色谱柱（50 mm×2.1 mm），购自上海精瑞科学仪器有限公司；水，来自实验室超纯水机，电导率大于18 MΩ。

1.1.2 主要仪器

M3000-TSQ Endura液相色谱串联质谱联用仪，购自Thermo公司；恒温水浴振荡器，购自上海精密仪器仪表公司；漩涡混合器，购自上海苑胜仪器设备有限公司；低温高速离心机，购自美国贝克曼公司。

1.2 标准溶液配制

准确量取适量上述标准品，用甲醇溶解并定容，配置成1μg/m L的单标储备液，置于4℃冰箱保存。各吸取一定量上述浓度的单标储备液，用95%甲醇水溶液配置成0.5、1.0、5.0、12.5、25.0、50.0 ng/m L的混合标准工作液。

1.3 仪器条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：Thermo scientific25002-052130(50 mm×2.1 mm）；柱温40℃，流速0.3 m L/min，进样量5μL，流动相甲醇-0.1%甲酸水。梯度洗脱条件见表1。

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