北方伟业计量集团有限公司
| 培养基 | 酵母浸粉：3.0，麦芽提取物：3.0，葡萄糖：10.0，酪蛋白胨：5.0，琼脂：20.0，pH：6.2±0.2（25℃） |
| 传代方法 | 使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签； 1.取酵母细胞（最多不超过5×107cells），12,000rpm(13,400×g)离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过几次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）； 2.酵母细胞壁的破除：酶法：向菌体中加入600μL山梨醇buffer，加入大约50U Lyticase（客户自备，目录号：RT410），充分混匀。30℃处理30min。4000rpm(1500×g)离心10min，弃上清，收集沉淀。注意：以上为5×107酵母细胞的Lyticase用量，根据酵母的菌株和酵母细胞数量的不同，所用Lyticase的浓度和孵育时间应该进行适当调整； 3.向沉淀中加入200μL缓冲液GA重悬沉淀，充分混匀。如果需要去除RNA，可加入4μL RNase A（100mg/mL）溶液（客户自备，目录号：RT405-12），振荡15sec，室温放置5min； 4.加入20μL Proteinase K溶液，混匀； 5.加入220μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取的DNA不纯； 6.加220μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠； 7.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm(13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 8.向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 9.向吸附柱CB3中加入600μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(13,400×g)离心30sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中； 10.重复操作步骤9； 11.将吸附柱CB3放回收集管中，12,000rpm(13,400×g)离心2min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验； 12.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μL洗脱缓冲液TE，室温放置2-5min，12,000rpm(13,400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。注意：为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2min，12,000rpm(13,400×g)离心2min。洗脱缓冲液体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解； |
| 生长条件 | 培养温度30℃；培养时间24-48小时；气体环境好氧； |
| 存储条件 | 2-8℃ |
| 安全等级 | 1 |
| 形态 | 菌落直径为1-2mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面乳白色，中间凸起，表面光滑，表面明亮，质地黏稠，质地湿润，G＋（蓝紫色），球菌，纯度：纯 |
| 分离基物 | Nail infection |
| 共享方式 | 公益性共享 |
| 证书下载 | 说明书文件 |
蜡状芽孢杆菌基因组DNA
(Genomic DNA from Bacillus cereus)
BNCC369921
两歧双歧杆菌基因组DNA
(Genomic DNA from Bifidobacterium bifidum)
BNCC369924
粪肠球菌基因组DNA
(Genomic DNA from Enterococcus faecalis)
BNCC372743
阴道范妮黑塞氏菌基因组DNA
(Genomic DNA from Fannyhessea vaginae)
BNCC362764
双路普雷沃氏菌基因组DNA
(Genomic DNA from Prevotella bivia)
BNCC362765
需血斯尼思氏菌基因组DNA
(Genomic DNA from Sneathia sanguinegens)
BNCC362766
白假丝酵母
BNCC186382
幽门螺旋杆菌
BNCC354364
生活饮用水总大肠菌群标准质控样品（多管发酵法）
BNCC360412
植物乳杆菌
BNCC336421
胰蛋白胨大豆液体培养基
BNCC352232
单增李斯特氏菌
BNCC185986
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