纸莎草的化学成分研究（一）

纸莎草（Cyperuspapyrus）为莎草科（Cyperaceae）莎草属（Cyperus）植物，是一种高大的水生或水湿生植物。纸莎草又称纸草、埃及莎草或埃及纸草，原生于欧洲南部、非洲北部以及小亚细亚地区，是构成较深水中植被的主要植物。纸莎草是古埃及文明的一个重要组成部分，古埃及人利用其制成的书写载体，曾被欧洲人和阿拉伯人使用，历3000年不衰，直至公元8世纪，中国造纸术传到中东取代了莎草纸。

纸莎草具有很强的水体净化功能，多被培育和改良为水体景观植物。目前国内外对纸莎草的研究主要在其水质净化功能方面，关于其化学成分的研究不多，生物活性方面除了美白护肤作用外鲜有报道。纸莎草的同科同属植物莎草（C.rotundus）的干燥根茎为《中国药典》收载的常用中药香附，具有解热镇痛和抗炎等活性，临床常用于治疗痛经、月经失调和胃肠紊乱等病症。核因子-κB（NF-κB）是细胞内重要的核转录因子，它参与机体的炎症反应和免疫应答过程，NF-κB信号通路的过度激活，与人类包括癌症在内的多种炎症相关性疾病的发生发展关系密切，因此抑制NF-κB信号通路的过度活化，有可能成为相关疾病的治疗手段。为了深入研究纸莎草化学及活性成分，对纸莎草全株进行了研究，从中分离鉴定了19个化合物，并发现了9个对TNF-α诱导激活的NF-κB信号通路有抑制作用的活性化合物。

1实验部分

1.1植物材料

纸莎草全株由昆明植分生物技术有限公司于2018年8月采集于昆明马金铺，样品经云南中医药大学李国栋副教授鉴定为纸莎草的全草（Cyperuspapyrus），标本（YMU-ZF20180917）保存于民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室。

1.2仪器与试剂

制备、半制备HPLC及LC/MS流动相所用有机溶剂为色谱级甲醇和乙腈（霍尼韦尔，美国），水为纯净水（娃哈哈，中国）；其它化学试剂均为分析纯；SephadexLH-20（GEHealthcare，美国）；柱色谱用MCIGELCHP20/P120填料（三菱化学，日本）；薄层色谱硅胶板GF254；柱色谱用硅胶（60~100、100~200、200~300、300~400目）；显色剂：10%磷钼酸-乙醇溶液和茴香醛、10%硫酸-乙醇溶液（105℃加热显色）、5%硫酸-乙醇溶液、碘；DMEM培养基、胎牛血清、谷氨酰胺（BiologicalIndustries，以色列）；Lipofectamine2000（ThermoFisher，美国）；地塞米松（Aladdin，中国）；双荧光素酶报告基因检测试剂盒（Promega，美国）。

EYELAN-1100自动旋转蒸发仪（上海爱朗，中国）；EYELAOSB-2100水浴锅（上海爱朗，中国）；NP7000泵-NU3000制备液相（江苏汉邦，中国）；6420TripleQuadLC/MS（Agilent，美国）；1260Infinity半制备高效液相色谱（Agilent，美国）；DRX-400和DRX-600型核磁共振仪（Bruker，瑞士）；BS124S型电子分析天平（Sartorius，德国）；SpectraMaxi3x型酶标仪（MolecularDevices，美国）；5424R型离心机（Eppendorf，德国）；二氧化碳培养箱（ThermoFisher，美国）；5977MSD旋光仪（Agilent，美国）。

1.3实验方法与步骤

1.3.1提取与分离

纸莎草（12kg）干燥样品粉碎后，用95%甲醇冷浸提取6次，每次48h，合并提取液，提取液经过滤、减压浓缩后得浸膏1kg。将提取物浸膏混悬于适量温水中，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3次，合并浓缩液得到石油醚部分浸膏75g，乙酸乙酯部分浸膏100g和正丁醇部分浸膏12g。

石油醚部分浸膏（75g）先用MCI除色素及分离，洗脱梯度为50%、70%、90%、100%甲醇/水，经TLC检测合并相同组分，共得到10个组分，分别记为FrA.1~FrA.10。70%甲醇/水洗脱部分（FrA.4）用60~100目硅胶拌样进行正相硅胶柱色谱分离，洗脱梯度系统为石油醚∶二氯甲烷（1∶0~0∶1），经TLC检测合并相同组分，共得到5个组分，分别记为A4.1~A4.5。

A4.2先后用硅胶及SephadexLH-20柱层析分离，得到化合物1（10.5mg）和7（7mg）。A4.3先后用硅胶及SephadexLH-20柱层析分离纯化，得到化合物2（20mg）和9（10mg）。70%甲醇/水洗脱部分（FrA.5）用60~100目硅胶拌样进行柱色谱分离，洗脱系统为石油醚∶二氯甲烷=1∶0→0∶1，经TLC检测合并相同组分，共得到4个组分，分别记为A5.1~A5.4。A5.3先后用硅胶与SephadexLH-20柱层析（洗脱剂：甲醇）分离纯化，得到化合物3（8mg）和4（9mg）。90%甲醇/水洗脱部分（FrA.8）用制备高效液相色谱进行色谱分离，共得到5个组分，分别记为A8.1~A8.5。

A8.3先后用硅胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化，得到化合物5（22.5mg）、6（10mg）和8（8mg）。乙酸乙酯部分浸膏（100g）先用MCI除色素及分离，洗脱梯度系统为50%、70%、90%、100%甲醇/水，经TLC检测合并相同组分，共得到8个组分，分别记为FrB.1~FrB.8。70%甲醇/水部分（FrB.4）用60~100目硅胶拌样进行柱色谱分离，洗脱梯度系统为石油醚∶乙酸乙酯（1∶0→0∶1），经TLC检测合并相同组分，共得到5个组分，分别记为B4.1~B4.5。B4.2先后用硅胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化，得到化合物11（14mg）和19（23mg）。B4.3先后用硅胶柱层析和半制备高效液相色谱进行色谱分离纯化，分别得到化合物10（18mg，tR=35min）和14（14mg，tR=40min）。

B4.4先后用硅胶与SephadexLH-20柱层析（洗脱剂：甲醇）分离纯化，得到化合物15（15mg）。90%甲醇/水部分（FrB.7）用60~100目硅胶拌样进行柱色谱分离，洗脱梯度系统为石油醚∶乙酸乙酯（1∶0→0∶1），经TLC检测合并相同组分，共得到6个组分，分别记为B7.1~B7.6。B7.3先后用硅胶与SephadexLH-20柱层析分离纯化，得到化合物12（12mg）。B7.4先后用硅胶柱层析、SephadexLH-20柱层析和半制备高效液相色谱进行色谱分离纯化，分别得到化合物13（10mg，tR=30min）和16（8mg，tR=36min）。B7.5先后用硅胶柱层析与SephadexLH-20（洗脱剂：甲醇）分离纯化，得到化合物17（20mg）和18（10mg）。

声明：本文所用图片、文字来源《天然产物研究与开发》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。

相关链接：二氯甲烷，乙酸乙酯，甲醇