脂类的测定（三）

3、仪器

①抽提装置，见图。

②具塞离心管。

③离心机。

④布氏漏斗。

⑤具塞锥形瓶。

4、操作方法

准确称取样品5.00g于具塞锥形瓶中(高水分食品可加适量硅藻土使其分散)，加入60mL氯仿-甲醇混合液(干燥食品可加入2～3mL水)。连接提取装置，于65℃水浴加热，从微沸开始计时提取lh。提取结束后，取下锥形瓶，用布氏漏斗过滤，将锥形瓶及布氏漏斗用氯仿-甲醇混合液清洗，洗液一并收集于具塞锥形瓶中，置65～70°C水浴，回收溶剂，至物料呈浓稠态，但不能干涸，冷却。加入25mL石油醚和15g无水硫酸钠于具塞锥形瓶中，立即加塞振荡10min，将醚层移入具塞离心管中，以3000r/min离心5min 。用移液管迅速吸取上层清液10mL于已恒重的称量瓶中，蒸发除去石油醚后，于95～105°C烘箱中烘至恒重。

5、说明及注意事项

①本法适用于结合态脂类，特别是磷脂含量高的食品，如鱼、贝类、蛋类、肉、禽及其制品等食品酸度测定，对于含水量高的样品更为有效。

②溶剂回收到残留物尚具有一定的流动性，不能完全干涸，否则脂类难以溶解于石油醚，从而使测定结果偏低，最好在残留物有适量水时停止蒸发。

③无水硫酸钠必须在石油醚之后加入，以免影响石油醚对脂肪的溶解。根据残留物的多少，可加入无水硫酸钠5～15g。

五、罗紫-哥特里法

1、原理

利用氨-乙醇溶液破坏乳的胶体性状及脂肪球膜，使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中，而脂肪游离出来，再用乙醚-石油醚提取出脂肪，蒸馏去除溶剂后，残留物即为乳脂肪。

2、试剂

①25％氨水(相对密度0.91)。

②96％乙醇。

③乙醚(不含过氧化物)。

④石油醚(沸程30～60°C)。

3、仪器

罗紫-哥特里抽脂瓶，见图。

4、操作方法

精确称取样品(牛乳10.00mL，乳粉1.00～5.OOg，用10mL水，60⁰C分数次溶解)于抽脂瓶中，加入1.25mL氨水，充分混匀，置60⁰C水浴加热5min，再振摇2min，加入10mL乙醇，加塞，充分摇匀，于冷水中冷却后，向抽脂瓶中加入25mU乙醚，振摇0.5min，加入石油醚25mL，再振摇0.5min。敞口静置约30min。当上层液澄清时，读取醚层体积。从管口放出一定体积醚层倒入已恒重的脂肪烧瓶中。蒸馏回收乙醚和石油醚，挥千残余醚后，置95～105℃烘箱中干燥2h，冷却，称量。

5、计算

式中：

m₂——烧瓶和脂肪的质量，g；

m₁—一烧瓶的质量，g；

m₀——样品的质量，g；

V₁——放出醚层体积，mL；

V——读取醚层总体积，mL。

6、说明及注意事项

①本方法为乳及乳制品脂类定量的国际标准法，被ISO、FAO/WHO采用。本方法适用于各种液状乳(生乳、加工乳、部分脱脂乳、脱脂乳等)、各种炼乳、乳粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。

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