咪唑类离子液体提取沙棘叶总黄酮的研究（四）

3、正交试验优化提取工艺结果讨论

由表2分析可知，A因素中各水平影响顺序为A₃＞A₂＞A₁，B因素中各水平影响顺序为B₃＞B₂＞B₁，C因素中各水平影响顺序为C₃＞C₂＞C₁，D因素中各水平影响顺序为D₂＞D₃＞D₁，E因素中各水平影响顺序为E₂＞E₃＞E₁。影响沙棘叶中总黄酮提取率因素的大小顺序为：B＞D＞E＞C＞A，即微波功率＞料液比＞离子液体浓度>微波温度＞微波时间，微波功率对棘叶的总黄酮提取率影响最大。最佳提取工艺条件为A₃B₃C3D₂E₂，即微波时间6min，微波功率500W，微波温度80℃，料液比1∶20（g·mL^-1），溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑浓度1.0mol·L^-1。

4、验证试验

由于优化的提取工艺正交试验结果表中没有，为了进一步验证优化方法的可靠性，按优化工艺进行验证试验。准确称取未洗阴干沙棘叶粉末1.0g，在最佳提取工艺：微波时间6min，微波功率500W，微波温度80℃，料液比1∶20（g·mL^-1），离子液体浓度1.0mol·L^-1的条件下提取沙棘叶总黄酮，测得提取率为10.63％，该提取率高于表3.1中的每一项提取率。验证结果表明，优化后的提取工艺结果可靠。

5、不同前处理的沙棘叶对提取效果的影响

由图8可知，沙棘叶前处理方式不同，总黄酮提取率略有差别。总黄酮提取率大小顺序为：

G＞A＞F＞B＞D＞C＞E，即炒制（5月份）＞水洗阴干（6月份）＞自然干晒（5月份）＞未洗阴干（6月份）＞炒制（6月份）＞发酵阴干（6月份）＞蒸青制作（5月份）。其中，炒制（5月份）沙棘叶总黄酮提取率最高。

6、沙棘叶总黄酮抗氧化活性试验结果讨论

由图9、10可以看出，VC与沙棘叶总黄酮对DPPH自由基的清除率与浓度成正比。VC对DPPH自由基清除率IC₅₀=0.0019mg·mL^-1。沙棘叶总黄酮的浓度对DPPH自由基的清除率IC₅₀=0.0511mg·mL^-1。虽然沙棘叶总黄酮对DPPH自由基的清除率小于VC，但也具有一定清除力。

三、结论

本试验采用单因素分析结合正交试验的方法，研究了影响沙棘叶总黄酮提取率的因素以及最佳提取工艺，并研究了最佳提取条件下提取的总黄酮对DPPH自由基的清除率。研究结果显示，影响沙棘叶总黄酮提取率因素的大小顺序为：微波功率＞料液比＞离子液体溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑浓度＞微波温度＞微波时间。其中微波功率对沙棘叶总黄酮的提取率影响最显著。最佳提取工艺为：料液比1∶20（g+mL^-1），微波功率500W，微波温度80℃，微波时间6min，离子液体溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑的浓度1.0mol·L^-1在该提取条件下，沙棘叶总黄酮提取率平均值为10.63％。炒制沙棘叶（5月采摘）总黄酮提取率最高。由抗氧化活性研究试验结果得知，该工艺下提取的沙棘叶总黄酮对DPPH自由基具有较好的清除能力。

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