酿酒原料及白酒中黄曲霉毒素B1的测定方法改进（二）

2结果与讨论

2.1色谱条件的选择

流动相不仅运载样品，而且对于物质的分离、响应至关重要。AFTB1液质检测常用流动相为乙腈-甲醇和乙酸铵、乙腈和乙酸-乙酸铵、甲醇-乙酸铵、甲醇和水等。

有研究表明，在流动相中适当的加入甲酸（HCOOH）可增加化合物的ESI离子化效率从而提高检测的灵敏度，克服样品分析中基质效应的干扰并拓宽化合物标准曲线的动态线性范围。因此我们针对前三个流动相进行了优化和对比试验，结果发现在甲醇-乙酸铵流动相中，A相2mmol／L乙酸铵中加入0.02%的甲酸，同浓度的AFTB1响应值最高。AFTB1及13C17-AFTB1的MRM色谱图如图1。

2.2质谱条件优化

采用ESI正离子的多级检测模式，对MS条件进行了优化，最终确定加热块温度为450℃，DL温度为250℃，雾化气流速为3.0L／min，干燥气流速为15L／min，离子源接口电压+4.5，驻留时间为10ms，在以上质谱条件下，对产物离子进行了自动优化，得到的MRM优化参数如表2。

2.3线性范围

将AFTB1系列标准工作液按照1.3中的分析条件进行测定，内标法定量。以AFTB1与13C17-AFTB1的峰面积比为纵坐标，浓度比为横坐标，绘制校准曲线，曲线方程为：Y=0.714338X-0.01059，校准曲线线性关系良好，如图2,r值>0.999；方法定量限为0.05ng／mL，检出限<0.01ng／mL，均低于国标检测方法。

2.4精密度试验

对浓度为1ng／mL和5ng／mL的标准工作液，分别连续测定6次，考察仪器的精密度，峰面积的重复性结果如表3。结果显示，1ng／mL、5ng／mL标准品的浓度相对标准偏差（RSD%）分别为1.04%和5.03%，仪器精密度良好。

2.5回收率试验

在酿酒原料及白酒中加入一定量的13C17-AFTB1同位素内标和AFTB1中间标准液（100ng／mL），得到不同浓度的加标样品，再根据1.4的方法进行样品的处理，测定其回收率如表4。酿酒原料高粱、大麦、小麦及白酒的回收率都在90%～105%之间，完全符合要求。

3结论

本研究采用三重四级杆液质联用仪建立了酿酒原料及白酒中AFTB1的检测方法。样品前处理相对简单，通过对比流动相选择：甲醇和0.02%甲酸-2mmol／L乙酸铵，仪器灵敏度最好，且降低了仪器检测限和方法定量限。该方法灵敏度高、重复性好，分析速度快，适合企业对酿酒原料和白酒中AFTB1的检测。

所绘制校准曲线线性关系良好，r值>0.999；方法定量限为0.05μg／kg，检出限<0.01μg／kg，均低于其他检测方法。原料与白酒的加标回收率都在90%～105%之间，完全符合要求。

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