三相萃取法提取玛咖多糖的工艺研究（二）

二、结果与讨论

1、单因素实验

（1）（NH₄）₂SO₄添加量对玛咖多糖提取率的影响

由图1可知，开始随着（NH₄）₂SO₄添加量从10%增加到30%时，玛咖多糖的提取率在增加，由35.5%增加至40.9%，这可能是NH₄⁺和SO₄⁺可以稳定大分子间的相互作用，使萃取体系更加稳定，多糖能更好地溶解在溶剂中；当（NH₄）₂SO₄添加量增加到40%及以后，玛咖多糖的提取率呈减少趋势，这是由于盐浓度过高会使多糖和水分子之间的氢键作用力被减弱，从而降低了多糖的提取率，因此初步选择液料比为10%～30%之间。

（2）叔丁醇添加量对玛咖多糖提取率的影响

由图2可知，随着叔丁醇添加量的增加，玛咖多糖的提取率也相应增加，在叔丁醇添加量在5mL～10mL之间，玛咖多糖提取率增加幅度较大，这可能是由于增加叔丁醇的含量和（NH₄）₂SO₄的含量引起相互作用的结果，导致多糖提取率的增加；但是当叔丁醇添加量超过15mL后，玛咖多糖的提取率大幅下降，这可能是叔丁醇的含量过高不利于三相体系的稳定性，所以初步选择玛咖多糖的叔丁醇添加量在5～15mL之间。

（3）萃取温度对玛咖多糖提取率的影响

由图3可知，当玛咖多糖萃取温度在20℃～40℃之间逐渐增加时，玛咖多糖的提取率34.3%增加至41.5%，这可能是因为温度的增加让三相萃取溶液体系中分子热运动加快，这样玛咖多糖更容易从玛咖粉中进入到萃取溶液中，从而玛咖多糖的提取率增加；当萃取温度超过40℃以后，玛咖多糖的提取率出现下降，这可能温度增加超过一定范围后，虽然多糖分子的热运动速度增加了，但是与其他物质间的反应以及反应速率也在增加，提取出的玛咖多糖颜色也在加深，说明高温对玛咖多糖的活性也有影响，所以选择提取温度20℃～40℃进行响应面优化实验。

（4）水提次数对玛咖多糖提取率的影响

由图4可知，蒸馏水提次数对玛咖多糖的提取率影响不大，在提取1～4次范围内，多糖提取率都在42%左右波动。提取1次时，多糖提取率最低，为41.6%；提取4次时，多糖提取率最高，为42.1%，两种之间相差不大。从节约和经济的角度考虑，将提取次数定为1次，考虑到提取次数对玛咖多糖提取影响不明显，故而在响应面试验中提取次数不作为考察因子进行考虑。

2、响应面优化实验

由Design-Expert软件处理数据，方差分析结果见表2。对响应值与各个因素进行回归拟合，该模型对应的回归方程：

多糖提取率=43.4+1.6A+1.8B+1.2C-0.83AB-1.48AC0.33BC-2.14A²-7.79B²-4.24C²

由表3结果可知，整体模型P值＜0.01，说明此时回归方差模型极显著，该试验方法可靠。方程失拟项也极显著，该回归模型与实测值能较好的拟合。其中A-（NH₄）₂SO₄添加量，B-叔丁醇添加量对响应值影响显著（P＜0.05），B2、C2对响应值影响极显著（P＜0.01），各个因素对玛咖多糖得率影响大小顺序依次为：叔丁醇添加量（B）＞（NH₄）₂SO₄添加量（A）＞萃取温度（C）。

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