维生素C-盐酸溶液一次浸提植物中Cu,Zn,Fe,Mn的原子吸收分光光度法(试用)

一、方法选择的依据

测定植物或土壤中微量元素含量的方法，目前广泛采用的是原子吸收分光光度法(AAS)。本法具有灵敏度高、干扰少、准确、分析速度快等优点。但在测定植物中微量元素含量时，常因样品前处理(高温干灰化或强酸消煮)方法不同，致使测定结果有差异。另外，处理植物样品的速度也远不能适应AAS法的分析速度。因此，人们试用稀HCI浸提植物中Cu,Zn,Fe,Mn等金属元素，以替代常规的干、湿灰化法。但Fe的提取率均偏低，最近有人提出在80℃时，用维生素C(Vc)-盐酸溶液Cc(HC1)=2mol·L^-1]浸提液，可以一次性完全提取植物中Cu, Zn,Fe,Mn等，特别是可把Fe完全提取出来。测定数据与湿灰化法十分吻合，经t检验这两种方法无显著性差异，说明浸提法完全可以替代干、湿灰化法。

稀HC1浸提与AAS法匹配，手续简捷、操作方便，适于大批里样品分析，不失是一种快速测定植物微量元素的理想方法。如果采用笑气-乙炔火焰或石墨炉原子吸收光谱法，还可对同一份浸出液中的B和Mo进行定量测定。在有条件的实验室，可采用当代先进的等离子体发射光谱法(ICP-AES),直接对浸出液进行一次性爆光，同时测定Cu,Zn,Mn,B,Mo,Fe等元素，它比AAS法具有更多的优点。

二、方法原理

植物样品在80℃下，用Vc-盐酸溶液[c(HCl)=2mol·L^-1]浸提，浸出液中的Cu ,Zn,Fe,Mn元素可直接用原子吸收分光光度法进行逐一测定。关于添加维生索C(Vc)提高HCI对植物中铁提取率的机理，可能是由于植物体内的高价铁被Vc还原和络合，而易被HC1完全浸出。

三、仪器及设备

恒温振荡器;原子吸收分光光度计。

四、试剂

维生素C-盐酸溶液［p(C₆H₃0₆)=0.4g·L^-1-c(HCl)=2mol·L^-1〕:称取0.40g维生素C(也称杭坏血酸.简称Vc，C₆H₃O₆，左旋，旋光度+21^o～+22^o，分析纯)于1L烧杯中，加约700mL水溶解，量取166.0 mL浓盐酸(HCl.p≈1.19g·mL^-1，优级纯)加入该烧杯中，拌匀，移入IL容量瓶中。用水定容，维生素C易氧化，此液现用现配。

五、操作步骤

（1）浸提 称取1.000g经烘干磨碎((1mm)的植物样品于塑料瓶中，加入25.0mL Vc-盐酸溶液(试剂1)，盖好内、外瓶盖，称取该塑料瓶重量，置于80⁰C恒温振荡器上振荡2h，再称该塑料瓶重，用蒸馏水补至原重后过滤，滤液待用。

（2） AAS计测定吸收值 由于植物样品中的Cu, Zn,Fe,Mn含量一般较低，所以这些元素可以直接用HC1浸出液测定。各元素的测定波长是:Cu 324.7nm,Zn 213.8nm,Fe 248.5nm,Mn 279.5nm。同时作空白试验。

（3）工作曲线 将待测元素混合配制在同一标准溶液中，其中加入与待测液相同量的HC1浸提液。工作曲线浓度为:Cu 0.5 mg·L^-1～2. 5 mg·L^-1,Zn 0.4 mg·L^-1～2.0 mg·L^-1, Fe 2.0 mg·L^-1～10.0 mg·L^-1，Mn 1.0 mg·L^-1～5.0 mg·L^-1。在与试样测定相同的工作条件下，分别测定吸收值并绘制工作曲线。不同型号的仪器其操作条件各不相同，需分别试验各自适宜的工作曲线范围和去干扰的方法。

六、结果计算

式中: ω(Cu,Zn,Fe,Mn)——分别为植物中全铜、锌、铁、锰的质量分数，mg·kg ^-1；

P——测得浸出液中Cu,Zn,Fe,Mn的质量浓度，mg·L^-1；

V——浸出液体积，mL；

m——烘干植物样品质量，g。

参考资料：土壤农业化学分析方法