时间分辨荧光在免疫分析中的应用进展（二）

2.1.1传染病诊断

由于人体感染HBV病毒而引起的乙型病毒性肝炎(viralhepatitistypeB)在病毒性肝炎中发病率最高。因此，HBV病毒的灵敏检测对乙型肝炎临床诊断具有重要意义。Liang等以HBsAg、HBeAg两种病毒抗原作为标志物，建立了HBsAg/HBeAg双标记TRFIA法，与商用HBsAg、HBeAg单标记TRFIA试剂盒的检测结果相一致。为了进一步提高检测灵敏度，Tan等在合成双功能铕螯合剂BCPDA的基础上，引入生物素-链霉亲和素(BSA)系统，对HBsAb进行标记，检测时间分辨荧光强度，结果显示，BSA系统的多级放大效应使标记物BCPDA-Eu3+-HBsAb-BSA的荧光强度比BCPDA-Eu3+-HBsAb提高了10倍以上。

2.1.2癌症诊断

癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)作为广谱肿瘤标志物，在肿瘤的鉴别诊断、病情监测、疗效评价等方面，具有重要的临床价值。Zhou等提出了一种独特的基于无机稀土掺杂纳米溶解-增强发光的生物测定方法(DELBA),使用NaEuF4作为纳米探针，比传统的DELFIA检测结果提升了约3个数量级。然而，在癌症的临床诊断中，单一肿瘤标志物的免疫学检测常常会导致漏检，为避免该种情况发生，一般选择检测两种及以上标志物。Huang等成功开发了一种同时测定糖类抗原CA125和CEA的TRFIA新方法，可用于临床血清标本的检测，从而监测胃癌的发生、发展，便于早期治疗。

2.1.3其它疾病诊断

近年来，肾脏病患者的发病率、住院率均有明显升高，严重威胁着人类的健康，因此对肾脏相关疾病的早期诊断至关重要。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志之一，Wang等建立了一种基于铕螯合微粒的DELFIA结合免疫磁珠分离技术的检测系统，用于测定尿液标本中的NGAL,检测限为0.32ng/mL。

糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病,Dalem等建立了一种自动化双标记三叶型TRFIA(TT-TRFIA)新方法，用于同时测定胰岛素原，C-肽及其比率(PI∶C),与常规的葡萄糖钳夹实验相比，该方法操作程序相对简单、PI∶C比值的精准度更高，有利于预测糖尿病的发生及其治疗后的监测。

2.2TRFIA在食品检测中的应用

食品安全与人们的日常生活息息相关，直接影响着人类的健康问题，TRFIA作为一种新兴技术(表2),目前已经应用于食品中添加剂、药物残留、真菌毒素以及致病菌等方面的检测。

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