恰玛古食用与药用研究进展 （二）

2恰玛古中的有效成分提取

2.1黄酮提取

翟金兰等探讨了微波功率、料液比和微波处理时间对类黄酮提取效果的影响，微波辅助提取恰玛古中类黄酮物质较佳工艺参数为乙醇体积分数70%、输出功率450 W、微波处理时间70 s、料液比1∶20(g/mL),在此条件下类黄酮物质质量分数为0。502%,微波法与常规的水浴加热法比较可显著缩短提取时间，提高提取效率。马菁等以新疆恰玛古为原料，使用微波乙醇萃取技术提取其中类黄酮成分，研究了乙醇浓度、料液比、微波功率和萃取时间4个因素对生物类黄酮含量的影响。以类黄酮的含量为指标，通过响应面分析，对提取工艺条件进行优化，最优条件为：乙醇体积分数72%,料液比1∶12(g/mL),微波功率435 w,萃取时间80 s,在此条件下恰玛古中的类黄酮含量为0。636 8 g/100 g。帕丽达·阿布利孜等采用索氏提取恰玛古种子中的黄酮类化合物，提取工艺为30倍原料质量、体积分数75%乙醇、提取时间120 min提取的黄酮质量分数2。805%。

2.2多糖提取

赵滢等用响应面法优化超声辅助提取蔓菁多糖，其最优提取条件为：液料比44∶1(mL/g)、提取温度57℃、提取时间56 min、超声功率180 W,在此条件下蔓菁多糖得率为65。43%。刘艺采用水提法提取陕西合阳恰玛古多糖，工艺为料液比1∶2(g/mL)、温度100℃、提取1 h、1次，并用3,5-二硝基水杨酸比色法测定含量，结果表明，合阳恰玛古多糖的平均质量分数为21。78%。高文军等以葡萄糖为对照品，3,5-二硝基水杨酸用量2。0 mL,90℃水浴6 min,540 nm波长下测定蔓菁中还原糖和总糖质量分数分别为5。86%～6。93%和44。65%～46。50%。

2.3硫代葡萄糖苷提取

目前，恰玛古中硫代葡萄糖苷提取工艺主要为高温水煎煮,而在此条件下，硫代葡萄糖苷极易发生降解，引起成分变化。张涛等应用溶剂法和酸性氧化铝提取、分离、纯化恰玛古硫代葡萄糖苷，并优选出最佳提取分离工艺，但其产率仍然偏低，但可以避免硫代葡萄糖苷在水提取过程中的降解损失问题。由此推测，可能是硫代葡萄糖苷在恰玛古药材中的含量较低，并且该成分以苯甲基硫代葡萄糖苷计算，得到的提取物为多种硫代葡萄糖苷混合物。目前大部分研究人员应用酸性氧化铝填料来进行纯化。

2.4脂肪酸提取

彭彤等利用气质联用分析，恰玛古挥发油中的化学成分，涵盖了烷烃、烯烃、芳香环、脂肪酸类、酯类和硫醚类化合物。其中主要成分为丙酸异丙酯、辛烷、2-甲基庚烷、正壬烷、二甲基三硫醚、3-甲基庚烷、二甲基二硫醚、1-辛烯、乙酸异丁酯和油酸己酯等。王强等用GC与GC-MS联用技术对恰玛古子油中的脂肪酸成份进行了定性与定量的分析，共鉴定出7种脂肪酸：棕榈酸、亚油酸、油酸(Z)、油酸(E)、16-甲基-十七烷酸、二十碳烯-11-酸和花生四烯酸。

2.5其他成分提取

海仁古丽·麦麦提等采用超声波提取恰玛古中总多酚，工艺为固液比1∶30、乙醇体积分数40%、时间30 min、功率159 W,并用紫外分光光度计法测定总多酚含量为13。09 mg/g。周芳对阿克苏恰玛古体积分数75%乙醇提取物乙酸乙酯部位、水饱合正丁醇部位的化学成分进行分离。综合利用硅胶、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱色谱、重结晶等方法，分离得到5个单体化合物，利用1H-NMR,13C-NMR并结合化学方法对4个单体化合物结构进行解析，鉴定的化合物为：槲皮素、β-谷甾醇、蔗糖和正二十四烷，其中槲皮素、正二十四烷为首次从该植物中分离得到。马彦玲将恰玛古干燥种子用95%乙醇提取，浸膏通过不同极性的溶剂萃取，再将得到的石油醚部位、乙酸乙酯部位、及正丁醇部位分别采用硅胶柱层析、大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、制备薄层色谱和重结晶等方法进行分离纯化，从恰玛古种子萃取后的各部位分离并鉴定了8个化合物的结构，分别为：齐墩果酸、β-谷甾醇、软脂酸单甘油脂、邻苯二甲酸二丁酯、熊果酸、槲皮素、山萘酚-3-O-芸香糖苷和5-羟基-3′,4′,6,7-四甲氧基黄酮，其中化合物齐墩果酸、软脂酸单甘油脂、邻苯二甲酸二丁酯、熊果酸、槲皮素、山萘酚-3-O-芸香糖苷和5-羟基-3′,4′,6,7-四甲氧基黄酮为首次从恰玛古种子中得到。

3恰玛古的药理研究

3.1历代文献

纵观历代文献，其运用丰富多彩，芜菁根《食疗本草》:“主消渴，治热毒风肿”;《肘后方》:“捣敷豌豆疮，有根丁疮，卒肿毒起急痛和犬咬伤疮”;《千金方》:“和盐捣敷一切热肿毒，研末酒后服以辟酒气”;《兵部手集方》:“捣敷乳痈痛寒热者”;《本草从新》:“末服解酒毒”。

芜菁子《名医别录》:“主明目”;《本草纲目》:“辛、苦、平，无毒，可升可降，能汗能吐，能下能利小便，又能明目解毒，其效甚伟”。

《大医典》:“生发乌发，润喉顺气，滋补肾脏，通利关节等，治喉燥气短，肾脏瘦虚，骨节不利等”;《药物宝库》:“润肺止咳，软肠通便，开胃增食，溶石排石，通利小便等”。

当代《维吾尔药志》中记载：芜菁味甘、辛、苦，性温。入胃、肝、肾三经。开胸顺气、健胃消食、解毒，用于胸闷腹胃胀痛、食欲不振、疮疖肿毒等疾。鲜品、捣汁、干品均可用：内服6～19 g,外用适量。

3.2当代研究

3.2.1降血糖作用

采用常规的水提法从恰玛古中提取出粗多糖，并用Sevag法对其脱去蛋白，再通过回流、透析等方法把粗多糖纯化得到精制多糖，进而用恰玛古精制多糖进行小白鼠血糖试验。首先对恰玛古精制多糖进行DEAE-52离子交换柱层析纯化，对第一个洗脱得到组分BRPS1进行葡聚糖凝胶(Sephadex G-200)柱层析纯度鉴定。然后，采用红外光谱法分析BRPS1,并且对离子交换柱层析法洗脱得到的7种组分分别进行GC-MS分析。当剂量为400 mg/kg体质量时，3 d后的受试小鼠血糖值下降差异显著(P<0。05);6 d和9 d后的血糖值下降差异极显著(分别是P<0。01和P<0。001),说明恰玛古多糖具有显著的降血糖效果。海仁古丽·麦麦提等研究发现，恰玛古中性多糖对糖尿病模型有降血糖作用，高剂量组(0。20 g/kg)降血糖效果略强于中(0。10 g/kg)、低剂量组(0。05 g/kg)。

3.2.2增强免疫作用

通过紫外分光光度法测定小鼠血清中IgM抗体的水平和小鼠单核巨噬细胞对血流中碳粒的清除能力；测定小鼠耳廓肿胀度来考察恰玛古蜜膏对二硝基氯苯诱导的小鼠迟发型超敏反应的作用；采用镜检计数观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬红细胞的能力，以研究恰玛古蜜膏对小鼠免疫功能的影响。试验结果显示，恰玛古蜜膏有提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用的能力，可明显增强皮肤试验所引起的迟发型超敏反应，还有増强小鼠单核巨噬细胞清除血液中碳粒的功效，并能提升小鼠血清中IgM抗体水平。因此，根据试验结果可判定恰玛古蜜膏具有良好的增强免疫功能的作用，是一种良好的免疫促进剂。恰玛古内富含的硫化葡萄糖苷物质，水解后可产生芥子油，其具有增进食欲、促进肠胃蠕动、帮助消化和稀释毒素等作用,此有效成分能改善患者的消化道功能，降低药物引起的毒副作用，降低患者不良反应出现频率，促进体内吸收营养物质的功能，使得患者营养状况趋向改善。此外，恰玛古富含钙、磷、铁等元素，本身也有入胃、肝、肾三经，开胸顺气、健胃消食、解毒等药理作用，可调节人体电解质平衡，具有调节免疫的功效。恰玛古胶囊可提高FOLFIRI患者的KPS评分，改善其体力状态，对其免疫系统有正向调节作用。

3.2.3抗辐射作用

安熙强等用总剂量为6 Gy的60Co-γ辐射制备小鼠损伤模型，恰玛古粉灌胃恰玛古密膏口服给药，测定小鼠质量、外周血象、脾指数、胸腺指数以及骨髓嗜多染红细胞(Polychromatic erythrocytes,PCE)微核率的变化，结果发现，一定浓度的恰玛古粉对小鼠辐射后免疫系统和造血系统的损伤具明显防护和修复作用；与模型组比较，给药各组PCE微核率明显下降(P<0。05),恰玛古粉和蜜膏具有一定的抗突变作用。恰玛古粉和恰玛古蜜膏抗辐射效果近似。

3.2.4抗癌作用

候宝林研究发现，恰玛古多糖能明显抑制肺肿瘤细胞生长，延长小鼠的存活时间，并指出恰玛古多糖配合环磷酰胺联合用药可提高疗效：恰玛古多糖高剂量组抑瘤率为55%,配合环磷酰胺联合用药组抑瘤率为71%。国外流行病学研究证实了蔬菜对预防某些肿瘤发生有显著的效果。有研究表明恰玛古中具有含量较高的硫代葡萄糖苷,这一成分在细菌酶亦或是芥子酶催化下能够降解并生成异硫氰酸盐，硫代葡萄糖苷及其降解生成的产物是一种化学保护剂，能预防多种癌症发生。肖春霞通过恰玛古膏治疗大肠癌FOLFOX4化疗后脾虚湿盛型患者，经临床观察恰玛古膏可降低FOLFOX4化疗后白细胞下降发生率，可改善白细胞下降程度。恰玛古膏可以改善FOLFOX4化疗后中医症状积分増加、KPS评分下降及免疫指标下降，从而发挥减毒功效。但是恰玛古膏不可预防血红蛋白下降、不能提高化疗完成率。张涛等通过动物体内抗肿瘤试验，观察其对小鼠肉瘤S180、结肠癌CT-26的抑制作用。研究发现恰玛古硫代葡萄糖苷最佳提取工艺为加8倍量体积分数95%乙醇回流提取2次，每次1 h。酸性氧化铝纯化该成分的最佳工艺条件为洗脱液KNO3浓度0。15 mol/L,上样液质量浓度1 g/mL、洗脱液用量6倍于柱体积。该提取物对小鼠移植性肉瘤S180、结肠癌CT-26均显示出剂量依赖性的抗肿瘤作用。说明酸性氧化铝对于恰玛古硫代葡萄糖苷具有一定的富集纯化作用，而且其提取物具有抗肿瘤活性。杜琳等通过色谱技术，对恰玛古乙醇提取物的化学成分进行系统研究，其中分离出来的两个三萜类化合物经细胞毒性测试，对5种的常见癌细胞均有一定的抑制作用。

3.2.5抗菌作用

有研究表明十字花科蔬菜可预防多种癌症的发生，这与十字花科植物富含硫代葡萄糖苷有关，且相关研究证实硫代葡萄糖苷除了具有抗癌功效外，其水解产物对植物抵抗细菌、真菌、病毒和蚜虫都有重要作用。刘艺研究了芜菁硫代葡萄糖苷的抑菌活性，将硫代葡萄糖苷分成高、中、低3个剂量组。试验结果证实，合阳蔓菁总硫苷粗提液各浓度对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)都有一定的抑制作用，而对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)则没有明显的抑菌活性，且对与大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用表现出一定的量效关系，两者比较合阳蔓菁硫苷对金黄色葡萄球菌的抑菌作用好于对大肠杆菌的抑菌作用。王文宁等研究发现，蔓菁可以促进小鼠肠道内有益菌的增殖，抑制致病菌的增殖；同时可以促进小鼠肠道短链脂肪酸的产生。

3.2.6抑制甲状腺素合成的作用

大鼠试验表明经恰玛古提取物饲喂7个月，可提高甲状腺中酪氨酸的量，降低甲氨酸的量，说明其具有干扰甲状腺素后阶段合成的功能。

3.2.7抗突变作用

恰玛古中的叶绿素、维生素、微量元素可能是其抗诱变原因。钱晓薇等对80只小鼠进行腹腔内注射环磷酰胺0。145 g/kg 2次，后取股骨PCE观察其微核千分率。试验证实：恰玛古叶汁及恰玛古块根汁降低环磷酰胺诱发的小鼠PCE微核率及小鼠骨髓细胞染色体畸变率的机理，可能与其所含叶绿素、维生素、微量元素及其它可能有的抗突变成分有关，或者是上述成分共同作用的结果。

3.2.8抗衰老作用

《食疗本草》记载：“久蒸久暴；捣为粉，服之长生”。王花等研究发现，恰玛古对于D-半乳糖诱发的亚急性衰老模型有明显的延缓衰老作用，它能拮抗自由基损伤，减少D氨基半乳糖胺衰老模型小鼠血液丙二醛含量，提高血清超氧化物歧化酶活力与肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活力，提高脾和胸腺重量指数，增强免疫功能，从而达到延缓衰老的目的。

3.2.9抗疲劳

蔡啸镝等研究发现，恰玛古多糖对运动小鼠具有较好的抗疲劳活性，且浓度越大，抗疲劳活性越强。以小鼠负重游泳时间、小鼠血清尿素氮含量为比较对象；相比于生理盐水对照组，恰玛古多糖各试验组负重游泳时间均有延长，血尿素氮含量明显低于生理盐水对照组，而且恰玛古多糖浓度越大，血尿素氮含量越低。周林研究发现，恰玛古多糖对运动小鼠具有较好的抗疲劳活性。以小鼠游泳时间为比较对象，相比于空白对照组，恰玛古多糖在每次0。33～0。59 g/kg剂量范围内有明显的抗疲劳活性。唐伟敏研究表明，恰玛古多糖对负重运动小鼠具有良好的抗疲劳活性；以小鼠负重游泳时间为比较对象，相比于正常组，恰玛古多糖各试验组负重游泳时间均有显著延长，前5 min平均游泳速率都有提高。

3.2.10其他药理作用

钱晓薇以清洁级ICR小白鼠为试验动物，采用小鼠骨髓PCE微核试验、小鼠精子畸形试验以及分光光度法测定小鼠肝脏过氧化氢酶(Catalase,CAT)活性等试验方法，研究了温州市区交通污染物对小鼠的遗传毒性及恰玛古块根汁对它的拮抗效应。结果表明各试验点的灌恰玛古汁组的小鼠PCE微核率、精子畸形率以及CAT活性均明显低于相应的处理组。微核抑制率及CAT活性抑制率均为：十里亭的>火车站的>南站的；精子畸形抑制率为：火车站的>十里亭的>南站的。说明恰玛古汁对交通污染物诱导的小鼠PCE微核率、精子畸形率及CAT活性增高效应均具有较强的拮抗作用。钱晓薇以野生型果蝇、白眼果蝇为实验动物，研究不同浓度恰玛古块根汁在不同温度、不同空间下对其发生量的影响，在20℃下5%、10%、20%这3种质量分数芜菁汁对白眼果蝇在广口瓶内的发生量的影响与野生型果蝇的不同，前者增加幅度分别为-24。23%、14。62%、22。01%,而后者则分别为-25。35%、-17。27%、-17。91%,对白眼果蝇发生量的影响为低浓度的起抑制作用、中浓度和高浓度均起促进作用，对野生型果蝇发生量的影响则3种浓度均起抑制作用。25℃下20%质量分数芜菁汁使白眼果蝇在试管、广口瓶内的发生量增幅分别为64。51%、-10。11%,说明温度、浓度相同时大空间内白眼果蝇的发生量反而要小于小空间的，此条件下的小空间可能更有利于白眼果蝇的繁殖和生长，表明不同浓度芜菁汁对不同温度下的不同品系果蝇在不同培养瓶内的发生量的影响不同。张谦筱等、赵滢等研究发现，恰玛古多糖具有抗氧化活性，能够清除羟基自由基和DPPH自由基，低浓度的多糖就能达到较好的抗氧化作用。恰玛古成熟的种子具有补肾生精，健脾消食之功能，常用于性功能减退等症。

3.3食品研究

鲜恰玛古可切片、切丝、切块直接食用，也可以与羊肉炖服做成一款具有通肠开胃、消食化滞的药膳。

目前，新疆柯坪县圣泉实业有限公司已经批量生产了以恰玛古提取物为主要成分的口服液、胶囊、蜜膏、精油等系列产品。近期已完成恰玛古蜜膏急性毒性试验。公司研究了恰玛古蜜膏和恰玛古粉对小鼠免疫功能的影响，通过测定小鼠耳廓肿胀度，观察对二硝基氯苯诱导小鼠迟发型超敏反应的影响；通过紫外分光光度法测定观察小鼠单核巨噬细胞对血流中碳粒的清除能力；紫外分光光度法测定小鼠血清IgM抗体水平；镜检计数观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。结果显示恰玛古蜜膏14 g/kg剂量与恰玛古粉12 g/kg剂量能明显抑制二硝基氯苯诱导的小鼠迟发型超敏反应、促进小鼠血清中IgM抗体的生成，恰玛古粉6 g/kg和12 g/kg剂量能明显提高小鼠单核巨噬细胞对血流中碳粒的清除能力、提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力。恰玛古蜜膏和恰玛古粉均可调节机体的免疫功能，恰玛古粉的作用略优于恰玛古蜜膏。

4讨论与展望

恰玛古是维吾尔族传统的药食两用植物，含有多种有价值的化学成分，具有广泛的生物活性，研发前景广阔。随着社会进步和人们生活水平的提高，人们愈来愈关注健康和生活的质量，恰玛古作为新疆的地道药材，食用方便，且具有抗菌、降血糖、抗癌、抗辐射和增强机体免疫力等广泛用途而被越来越多的学者所关注，但是目前对恰玛古化学成分及活性的研究还相对较少，且对于恰玛古有效成分的研究还处于新化合物的发现和结构的测定阶段，对于恰玛古有效成分的构效关系、生物活性的测定方面的研究相对较少。恰玛古中硫代葡萄糖苷提取工艺主要有高温水煎煮、溶剂法和酸性氧化铝提取，但这几种方法提取硫代葡萄糖苷极易发生降解，引起成分变化，产率偏低，所以改进恰玛古中硫代葡萄糖苷提取工艺，减少其降解，是今后研究的方向。恰玛古水提物对延长果蝇寿命的影响可能与其所含的微量元素或某些特殊成分有关，其详细机理有待于进一步的研究和探讨。因而，对恰玛古化学成分进行深入的研究，明确各化合物的提取、纯化的方法，了解其构效关系，探讨其作用机理对于恰玛古有效成分的开发利用及保健品、新药的研制将有重要的指导意义。

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