固相萃取法

一、实验目的

掌握固相萃取法(SPE)的原理及基本操作技术；了解液相色谱仪的结构和原理。

二、实验原理

固相萃取技术具有重复性好、省溶剂、快速、适用性广、可自动化和用于现场等优点。固相萃取技术是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理，是一个包括液相和固相的物理萃取过程，利用杂质或目标化合物与样品溶剂和吸附剂之间亲和力的相对大小不同而达到分离的目的。

溶剂的强度影响固相萃取方法的回收率，包括活化溶剂、上样溶剂以及淋洗、洗脱所用溶剂的强度，本实验考虑淋洗溶剂的强度对目标物回收率的影响，淋洗时不宜使用太强溶剂，因为太强溶剂会将强保留杂质洗下来；使用太弱溶剂，会使淋洗体积加大。应选用适合溶剂进行淋洗，或可改为强溶质与弱溶剂混用。

三、仪器和材料

1、仪器

实验仪器为高效液相色谱仪(带紫外检测器)和固相萃取装置。

2、材料

实验材料为C₁₈固相萃取柱、带刻度试管、甲醇、超纯水、莠去津和西玛津标样。

四、试验方法

1、样品准备

称取5g土壤到离心管中，添加农药标准溶液100μL，使其浓度为0.2mg/kg，设置5个平行。另设5g空白土壤样品。用甲醇-水(50:50)混合溶液20mL提取，涡旋2min，以3800r/min离心5min。取10mL上清液到三角瓶中，之后调整5个平行样品的上样溶液甲醇与水的比例分别为50:50、60:40、70:30、80:20、10:90，即改变上样溶液的溶剂强度。

2、活化

依次用10mL甲醇和10mL纯水活化固相萃取小柱。

3、上样

将调整溶剂强度后的土壤提取溶液加入到C₁₈固相萃取柱中，使流出液保持5～10mL/min的速度。

4、淋洗

用5mL纯水洗涤后，空气泵抽气去除部分水分。

5、洗脱

以5mL甲醇洗脱目标物，用高纯氮气流浓缩后，用甲醇定容至1mL。

五、检测条件

色谱柱为C₁₈高效液相色谱柱，250mm×4.6mm。流动相为甲醇-水(60:40)，流速为1.0 mL/min。检测波长为220nm。进样量为10μL。

六、结果计算

计算经过固相萃取柱净化后的莠去津和西玛津的回收率。

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