北方伟业计量集团有限公司
沙棘为胡颓子科酸刺属的灌木或小乔木。因抗寒抗旱、耐盐碱、耐瘠薄、生态适应性广的特点,作为防风固沙、保持水土的“生态保护先锋树种”在我国被大面积种植,总面积达1800万亩,占世界沙棘面积的90%以上。沙棘是药食两用植物,具“活血散瘀、化痰宽胸、补脾健胃、生津止渴、清热止泻”之功效。沙棘甾醇是从沙棘果实中提取的一类天然甾体化合物,是植物生长过程中的重要次生代谢产物,被誉为“生命的钥匙”和“血管的清道夫”,具有抗氧化、降低血脂、免疫调节、消炎退热等功能,在医药、保健和食品领域具有广阔的发展空间。目前,对沙棘甾醇的研究仅限于制备工艺、成分鉴定和部分药理活性研究,对油脂抗氧化作用未见报道。本研究旨在探讨沙棘甾醇对油脂的抗氧化作用,为其作为一种天然、绿色、保健的食品抗氧化剂提供实验依据。
一、实验材料与方法
1、材料与试剂
沙棘甾醇:沙棘籽油购自青海省清华博众生物科技有限公司,采用皂化法提取粗甾醇,无水乙醇反复重结晶得纯化甾醇(经硫磷铁法测定,总甾醇含量为84.5%),40℃烘干作为实验药物;维生素C:纯度>99%,麦克林公司;维生素E:纯度>97%,麦克林公司;胡萝卜素:纯度>96%,麦克林公司;二丁基羟基甲苯(BHT):纯度>97%,北京索莱宝公司;大豆油:益海嘉里食品有限公司;猪油:华联超市购买新鲜猪板油,自制;冰乙酸、三氯甲烷:天津市富宇精细化工有限公司;可溶性淀粉、碘化钾:上海光诺化学科技有限公司;硫代硫酸钠标准液:北京海岸鸿蒙标准物质技术有限责任公司。
2、仪器与设备
SQP电子分析天平:赛多利斯科学仪器有限公司;电热鼓风干燥箱:上海一恒科学仪器有限公司;KQ5200v型超声波清洗器:昆山超声波有限公司。
3、方法
(1)沙棘甾醇不同添加量对油脂抗氧化作用
精密称取一定量的沙棘甾醇用无水乙醇溶解,按油脂质量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分别加入到装有80g大豆油和猪油的棕色广口瓶中作为供试油样,超声加搅拌混匀(超声温度50℃,超声时间10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白对照。采用Schaal烘箱贮藏实验,将所有样品敞口置于[(65±1)℃]恒温鼓风干燥箱中强化贮存,每12~14h超声(超声温度50℃)加搅拌混匀10min并交换它们在恒温箱中的位置,每4天每个油样平行测定3次,(结果误差≥5%,再平行取样3次),测定过氧化值方法依据GB5009227-2016《食品中过氧化值的测定》的规定,油脂抑制率=(不添加抗氧化剂油样的POV值-添加抗氧化剂油样的POV值)/不添加抗氧化剂油样的POV值*100%。
(2)沙棘甾醇与不同抗氧化剂对油脂抗氧化作用比较研究
精密称取一定量的沙棘甾醇、维生素C、维生素E、BHT和β-胡萝卜素用无水乙醇溶解,按油脂质量百分比0.02%分别加入到装有80g大豆油和猪油的棕色广口瓶作为供试油样,超声加搅拌混匀(超声温度50℃,超声时间10min),以不添加抗氧化剂的油脂做对照。精密称取一定量的沙棘甾醇用无水乙醇溶解,按油脂质量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分别加入到装有80g大豆油和猪油的棕色广口瓶中作为供试油样,超声加搅拌混匀(超声温度50℃,超声时间10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白对照。采用Schaal烘箱贮藏实验,将所有样品敞口置于[(65±1)℃]恒温鼓风干燥箱中强化贮存,每12~14h超声(超声温度50℃)加搅拌混匀10min并交换它们在恒温箱中的位置,每4天每个油样平行测定3次,(结果误差≥5%,再平行取样3次),测定过氧化值方法依据GB5009227-2016《食品中过氧化值的测定》的规定,油脂抑制率=(不添加抗氧化剂油样的POV值-添加抗氧化剂油样的POV值)/不添加抗氧化剂油样的POV值*100%。
(3)沙棘甾醇分别与维生素C、BHT复配对油脂抗氧化作用研究
精密称取一定量的沙棘甾醇、维生素C和BHT,以2:1、1:1、1:2比例复配,把复配抗氧化剂用无水乙醇溶解,按油脂质量百分比0.02%分别加入到装有80g大豆油和猪油的棕色广口瓶中作为供试油样,超声加搅拌混匀(超声温度50℃,超声时间10min),以不添加抗氧化剂的油脂做对照。精密称取一定量的沙棘甾醇用无水乙醇溶解,按油脂质量百分比0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%的比例分别加入到装有80g大豆油和猪油的棕色广口瓶中作为供试油样,超声加搅拌混匀(超声温度50℃,超声时间10min),以不添加沙棘甾醇的油脂做空白对照。采用Schaal烘箱贮藏实验,将所有样品敞口置于[(65±1)℃]恒温鼓风干燥箱中强化贮存,每12~14h超声(超声温度50℃)加搅拌混匀10min并交换它们在恒温箱中的位置,每4天每个油样平行测定3次,(结果误差≥5%,再平行取样3次),测定过氧化值方法依据GB5009227-2016《食品中过氧化值的测定》的规定,油脂抑制率=(不添加抗氧化剂油样的POV值-添加抗氧化剂油样的POV值)/不添加抗氧化剂油样的POV值*100%。
(4)统计学方法
所有实验数据均重复测定3次,采用SPSS19.0软件进行统计学分析,检测结果以±S表达,组间比较采用单因素方差分析,视P<0.05为差异有统计学意义。
二、结果与分析
1、沙棘甾醇不同添加量对大豆油和猪油抗氧化作用
表1~2显示,从0天到24天,所有供试油样POV值逐步升高,尤其空白油样显著升高,而添加沙棘甾醇的油样则增加缓慢,表明沙棘甾醇对大豆油和猪油的氧化均具有不同程度的抑制作用。0.01%、0.02%、0.05%、0.10%和0.20%沙棘甾醇对第24天大豆油氧化的抑制率分别为6.56%、10.17%、15.10%、18.01%和21.23%,对第24天猪油氧化的抑制率分别为7.12%、9.17%、21.70%、29.42%和33.43%,说明随着沙棘甾醇剂量的增加其抗氧化强度逐步增加,呈正相关的剂量依赖效应。对猪油的抗氧化效果优于大豆油,对猪油氧化的抑制率约为大豆油的1.4~1.6倍,这种特性可能与所含的脂肪酸种类不同有关,大豆油中饱和脂肪酸为19.23%,不饱和脂肪酸为80.77%,而猪油中饱和脂肪酸为49.57%,不饱和脂肪酸为50.43%,大豆油中不饱和脂肪酸含量远远高于猪油中的含量,造成大豆油更易被氧化变质。
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