北方伟业计量集团有限公司
(3)提取温度的选择
提取温度对多酚提取率的影响如图3所示。
分析图3数据可知,当提取温度从15℃升至35℃时多酚得率随之升高,继续升高提取温度,多酚得率反而呈下降趋势。这主要是由于温度的升高增加了提取物的溶解度和扩散系数,但也会引起热敏性多酚的降解,降低得率。
(4)物料比的选择
物料比对多酚提取率的影响见图4。随着物料比增加,提取液中的多酚含量增加,当物料比大于1:9以后,继续增加溶剂用量,多酚得率有所下降。为了达到较高的提取率,且节约提取成本,选择物料比1:9。
2、响应面确定最优提取条件实验
(1)响应面实验设计与结果
在单因素研究乙醇浓度、提取时间、提取温度和提取物料比的基础上,根据Box-Behnken实验设计方法,以多酚提取得率为响应值,设计四因素三水平的响应面实验,按照响应面设计进行多酚提取实验,实验数据如表2所示。
使用Minitab15.0软件对表2中响应面实验数据进行多元回归分析,得到以南极磷虾多酚提取得率(Y)为目标因子,以乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取温度(C)和提取料液比(D)为变量的二次多项式回归方程:
Y=1.1937+0.1108A+0.0195B+0.0468C+0.1158D-0.2402A2-0.1623B2-0.0970C2-0.2364D2-0.0750AB-0.1845AC+0.1298AD-0.0335BC+0.0460BD+0.0195CD
(2)回归方程方差分析
对实验拟合所得回归方程进行方差分析,结果如表3所示。
从表3可以看出,该模型的相关系数R2=98.80%,调整系数R2Adj=97.41,说明方程具有良好的拟后情况,可以真实反映溶液浓度(A)、提取时间(B)、提取温度(C)和提取料液比(D)与响应值多酚提取率之间的关系,可以用来进行较为准确的响应值分析与预测。方程一次项A、C与D的P值小于0.05,说明溶剂浓度、提取温度和提取料液比的变化对多酚提取率的影响显著,一次项B的P值为0.06>0.05,说明提取时间的变化对多酚提取率的影响不显著。二次项AA、BB、CC、DD、AB、AC与AD的P值均小于0.05,说明这些因素的交互作用影响显著,BC、BD与CD的P值都大于0.05,说明这几个因素的两两交互作用影响不显著。因素交互作用对响应值的影响结果可以通过图5的响应面曲面图直观地反映出来。使用Minitab15.0软件求解回归方程,得到南极磷虾多酚的最佳提取参数为:乙醇浓度80.0%,提取时间69.1min,提取温度35.5℃,物料比1:9.7。在此条件下,预测多酚提取率为1.231mg/g,考虑实际提取操作,将南极磷虾多酚提取条件修正为乙醇浓度80%,提取时间70min,提取温度35.5C,物料比1:10。使用修正参数进行南极磷虾多酚提取实验,测得多酚得率为1.227mg/g,与预测值基本对应,说明使用Minitab15.0软件拟合得到的南极磷虾多酚提取工艺参数真实可靠,具有实际提取应用价值。
三、结论
本研究通过响应面法优化南极磷虾多酚提取参数(乙醇浓度、提取时间、提取温度、物料比),最终确定最佳提取条件为:乙醇浓度80%,提取时间70min,提取温度35.5℃,物料比1:10,在此条件下南极磷虾多酚提取得率为1.227mg/g。采用有机溶剂浸提法提取南极磷虾多酚物质具有绿色简便,高效经济的优点,具有实际提取应用价值,且为进一步研究南极磷虾多酚的类型及功能活性提供实验基础。
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