脱糖大豆粉末磷脂中磷脂酸的分离（二）

2、单因素实验

（1）酸醇比对PA提取效果的影响

在提取温度为35℃、提取时间50min、料液比为1:30、提取次数1次、沉淀pH=7的条件下，考察酸醇比对PA提取效果的影响，结果见图5。

如图5所示，随着酸的浓度增加，PA的含量与回收率均呈现先上升后下降的趋势，在1.2:100处达到最高。当酸醇比小于1.2:100时，酸醇对PA的选择性强于磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositol，简称为PE）和磷脂酰乙醇胺(Phosphatidylethanolamine，简称为PE)，故PA含量与回收率会随着酸的增加而上升。当酸醇比大于1.2:100后，酸醇对PA的选择性达到峰值，对PI与PE的选择性却增加，PA的含量与回收率均下降，PA的最佳酸醇比为1.2:100。

（2）时间对PA提取效果的影响

在提取温度为35℃、酸醇比1.2:100、料液比为1:30、提取次数1次、沉淀pH=7的条件下，考察提取时间对PA提取效果的影响，结果见图6。

如图6所示，随着时间的延长，产品中PA的含量逐渐增加，于70min趋于平衡，而PA回收率却在70min后增长变缓。当提取时间达到70min，原料中的大部分PA已被酸醇萃取出来，PA回收率趋于平衡。提取时间超过70min，原料中的PE、PI等组分持续扩散进入酸醇之中，故PA含量逐渐下降，故理想的提取时间为70min。

（3）料液比对PA提取效果的影响

在提取温度为35℃、酸醇比1.2:100、提取时间70min、提取次数1次、沉淀pH=7的条件下，考察料液比对PA提取效果的影响，结果见图7。

如图7所示，PA的含量与回收率皆随着料液比的增加而上升。当料液比达到1:20时，增长放缓，至1:30时，PA含量达到最大。当料液比小于1:30时，溶液浓度较高，PI、PE与PA竞争性溶解扩散入酸醇中，随着料液比提高，传质动力增加，PA扩散速度加剧，显著高于其他组分，故PA含量与回收率不断增大；当料液比达到1:30时，PA萃取溶解量最大，产品PA含量与回收率达到最高值；但料液比大于1:30时，少量的PI与PE逐渐扩散进酸醇萃取液中，故PA含量出现了下降，但回收率不变。基于资源最大化原则，最佳料液比为1:30。

（4）提取温度对PA提取效果的影响

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取时间70min、提取次数1次、沉淀pH=7的条件下，考察提取温度对PA提取效果的影响，结果见图8。

如图8，随着温度的升高，PA的含量和回收率上升至45℃时达到顶峰后迅速下降。温度升高导致磷脂各成分分子运动加剧，利于磷脂分子向萃取液中的扩散，故PA含量增幅不显著。

当温度大于45℃后，磷脂易在高温下结块，增加了萃取PA的难度，PA的含量与回收率均下降显著，故最适宜温度为45℃。

（5）提取次数对PA提取效果的影响

在料液比l：30、酸醇比1.2:100、提取时间70min、提取温度45℃、沉淀pH=7的条件下，考察提取次数对PA提取效果的影响，结果见图9。

如图9所示，随着提取次数的增加，PA的含量出现轻微下降，1次可能已萃取出磷脂颗粒中绝大部分的PA，而随着提取次数的增加，磷脂其他组分如PI和PE由于缺乏PA的竞争性溶解也逐渐扩散入酸醇中，后续与PA同时沉淀出来，造成含量下降，而回收率略有提升。故最佳的提取次数为1次。

(6)pH对PA分离效果的影响

在料液比1:30、酸醇比1.2:100、提取时间70min、提取温度45℃、提取次数1次的条件下，考察pH对PA沉淀效果的影响，结果见图10。

如图10所示，随着pH的升高，PA含量整体呈现逐级上升的趋势，至pH=8时达到最高。主要原因在于，PA为弱酸性物质，在弱碱性条件下极易生成PA白色沉淀。蒋晓菲等的研究证实当pH＞5时PA溶液中出现白色絮状样的固体沉淀，同时部分PI与PE也会析出，本实验中亦观察到此现象。取沉淀溶于流动性中，经HPLC分析表明沉淀为少量PA与大量PE、PI的混合物。由于PA与PE、PI所带电荷不同，PA带有两个负电荷，故在pH＜6时不易沉淀，优先沉淀下来的是带有负电荷较少的PE与PI。当pH较低时，PA生成量有限，故沉淀中PA的含量和回收率都极低，大部分的PA仍然溶解在酸醇中，而随着pH的增大，PA开始沉淀DTI。当pH＞8后，PI和PE沉淀过多，故PA的含量有所下降。故最佳方法为先调节pH=5滤去杂质，后调节pH=8沉淀PA。

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