蛹虫草如何培育？

1、菌种分离

选择生长正常、健壮、无病虫害的新鲜蛹虫草作为分离材料，用野生早期生长（8月底以前出土）的蛹虫草分离得到的菌种具有明显的早熟性。菌种分离可采用孢子分离或组织分离，生产上常用组织分离法。将蛹虫草用清水洗去外表泥土，再用0.1%升汞液消毒1~3分钟，用无菌水冲洗数次，然后再用95%乙醇浸泡3~5分钟，用无菌水洗净后进行分离。用解剖刀切去虫体外部，避开肠道，切取内部白色组织块或其子座内的组织块接种。将组织块接种在分离培养基或加有50微克/毫升链霉素的加富培养基上，于20℃恒温箱培养10天左右，挑选性状良好者作为母种。以菌丝白色，粗壮浓密，呈匍匐状紧贴培养基生长，边缘整齐，无明显绒毛状白色气生菌丝，后期分泌黄色色素，菌丝见光后变橘黄色者为优良菌种。

将分离菌种进行扩大培养后，接种在米饭培养基上进行接种。于18~20℃培养20~30℃，若无污染则继续培养，1个月后即可形成橙红色子实体，评定种性，选性状优良者用于生产。 

2、母种培养

菌种分离和母种可以采用以下培养基：

3、PDA培养基

CM培养基：土壤浸出液100毫升，磷酸二氢钾1.5克，磷酸氢钾4克，链霉素50毫克，琼脂15克，加水至1000毫升。供分离用。

CM培养基：蛋白胨15克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾1克，维生素B₁半片，琼脂18克，松针浸出液500毫升，腐殖土浸出液500毫升。

CM₂培养基：纤维素粉20克，蛋白胨18克，葡萄糖20克，琼脂18克，水1000毫升。杂木屑200克，麦麸100克，葡萄糖20克，硫酸铵1克，琼脂20克，水1000毫升。

加富培养基：马铃薯200克，玉米粉30克，葡萄糖20克，蛋白胨3克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.5克，琼脂17~19克，水1000毫升。

Czapek培养基：硝酸钾2克，磷酸氢钾1克，氯化钾0.5克，硫酸镁0.5克，硫酸铁0.01克，蔗糖30克，琼脂18克，水1000毫升。

合成培养基：葡萄糖10克，蛋白胨10克，含脂蚕蛹粉12克，全脂奶粉10克，磷酸氢钠1克，磷酸二氢钾1.5克，琼脂20克，水1000毫升。
玉米淀粉20克，天门冬素5克，氯化钠0.5克，硫酸镁0.5克，酵母膏2克，磷酸二氢钾1克，碳酸钙1克，琼脂20克，水1000毫升。

亦可采用其他虫草菌培养基。将发满菌丝的蛹虫草在无菌环境下切成0.5厘米左右的小块，放置PDA在培养基内完成接种，无光条件养菌。按常规制作，灭菌。接种后，在20~22℃恒温箱培养，7~10天菌丝长满，保藏在0~4℃冰箱备用。 

4、原种和栽培种培养

原种培养基一般以麦粒为主料配方，在蛹虫草上建议直接使用母种接栽培种。

栽培种培养基使用大米培养基，即每瓶分别加入大米40克与营养液50毫升，然后于压力0.12兆帕、温度121℃下灭菌20分。原营养液成分如下：葡萄糖5克/升、黄豆8克/升、奶粉5克/升、柠檬酸三铵1.0克/升、磷酸二氢钾1.0克/升、硫酸镁1.0克/升、维生素B₁10毫克/升。进行120℃为期45分的高压杀菌，取出后待冷却即可。 

5、栽培季节

蛹虫草属中低温型菌类。在自然条件下，一年可栽培两季，春栽在2~3月，这时气温较低，可通过加温培养菌丝体，4~5月份自然气温上升到20℃左右，空气相对湿度大，正是子座生长的好季节；秋栽在7~8月份进行栽培，9~10月份出草，这样前期气温较高，有利于培养菌丝体，后期气温下降到20℃左右，有利于子座的生长发育。若在室内人工控制环境下四季均可栽培。 

6、栽培工艺

蛹虫草子实体的栽培主要有蚕蛹培养基栽培和麦粒培养基栽培两种方式，以大米或小麦培养基栽培为主。以下几种常用配方可供参考。
大米100%，磷酸二氢钾0.15%，维生素B微量，蛋清少许。

大米90%，高粱10%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.05%，酵母粉0.5%，蛋白胨0.2%。

大米50.8%，麸皮25%，玉米粉10%，蔗糖2%，杂木屑6%，蚕蛹粉6%，尿素0.1%，硫酸镁0.1%，维生素B微量。

大米68%，蚕恪粉26%，蔗糖5%，蛋白胨1%，维生素B微量。

大米67%，玉米30%，葡萄糖1%，蚕蛹粉1%，蛋白陈1%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.05%，柠檬酸铵0.05%，维生素B微量。

小米95%，葡萄糖3.5%，蛋白胨1.2%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.2%，维生素B微量。

高粱45%，玉米渣40%，小米10%，蔗糖2%，蛋白胨2%，酵母粉0.8%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%。

小麦94%，蔗糖5%，磷酸二氢钾0.1%，硫酸镁0.1%，酵母粉0.5%，蛋白胨0.3%。

取上述任意一种培养基，大米、小麦、高粱、碎玉米等在清水中浸泡5~6小时，沥去水后放入锅内蒸熟，加入辅助原料，调节含水量为60%~65%。用500毫升罐头瓶装料，每瓶装干料约50克，将料面压平，瓶口用聚丙烯薄膜包扎封口，一般采用高压灭菌，在0.147兆帕压力下（128℃）灭菌1.5小时，也可采用常压灭菌，于100℃下维持10小时（分两次灭菌各5小时，间隔5小时）。灭菌后培养基要求上下湿度一致，米粒间有空隙，不呈糊状。 

培养基冷却至30℃以下时，于无菌条件下接种。每瓶接种固体种10克或液体菌种10毫升。

7、菌丝培养

将接种后的瓶子排放在培养室的层架上进行培养，室内要保持黑暗、通风，空气相对湿度控制在65%左右。菌丝发育初期，为减少杂菌污染，室内温度宜保持在15~18℃，切忌温度忽高忽低，否则难以高产。15~20天后菌丝可长满料层，此时将温度调节到20~23℃，继续培养，超过25℃不易形成子座。 

8、出草管理

当菌丝体长满后即可增加光照，白天利用自然散射光，保持在200勒克斯，夜晚可用日光灯作光源，每天光照时间不少于10小时，以促进菌丝体转色和刺激原基形成。菌丝见光后由白色逐渐转变成橘黄色或橘红色。当培养基表面或四周有橘黄色色素出现，聚集有黄色水珠，并可见大小不一的圆丘状橘黄色菌丝隆起时，为子座即将形成的前兆。此时室内温度应保持在19~23℃，并提高空气相对湿度至80%~90%。湿度太大易诱发瓶内气生菌丝，对子实体生长不利；湿度太小易使培养料过早失水而影响子实体生长发育。为保持适宜湿度，可喷雾水于地面，每天3~4次。子实体生长期间要适当通风，补充新鲜空气，为减少瓶内水分散发，在整个培养期不揭去封口薄膜，可在薄膜上用针穿刺小孔，以利瓶内外气体交换。另外，蛹虫草有明显趋光性，光线不均匀会造成子实体扭曲或一边倒，因此在子实体形成之后，应根据情况适当调整培养瓶与光源的相对方向，或调整室内光源方向，使受光均匀，以保证子实体正常生长，提高产量和质量。 

9、采收加工

当子实体长高到7~8厘米，子座的上端有黄色粉末状物时，应及时采收。如采收过迟，则子实体枯萎或倒苗腐烂。采收时，用无菌手术镊将子实体从培养基上摘下即可。子实体采收后，将根部整理干净，及时晒干或低温下红外线烘干，然后用适量黄酒喷雾使其回软，整理平直后扎成小捆，用防潮包装保藏。如需保存，干品含水量应在13%以下，以防止发霉变质。采收第一潮菇后，停水3~4天，然后在瓶内注入营养液，10~20天后可长出第二批子座。

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