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茉莉花[Jasminumsambac(L.)Ai-ton]主要分为单瓣、双瓣和多瓣3种类型,其中双瓣茉莉花具有易栽培、产量高且香气浓郁等特点,是国际上种植最广泛的茉莉花品种。茉莉花多种植于亚热带地区,主要用以窨制花茶和提取香精油等。茉莉花茶的茉莉花香主要来源于窨制过程中茶坯吸附茉莉鲜花挥发的香气组分。因此,茉莉花香气组分是影响茉莉花茶品质的最关键因素。我国茉莉花的主要种植地为广西、福建和云南等省(区),其中2019年广西横县茉莉花种植面积达7200hm2,年产茉莉花约9万t,拥有130多家花茶企业,年产茉莉花茶7万多t,茉莉花综合年产值达122亿元,茉莉花产业已成为当地的特色地理标志。不同品种、地域条件和管理方式对茉莉花品质的影响较大,而现有的茉莉鲜花品质评价体系较薄弱,仅通过花苞的饱满程度进行简单分类评价不能体现其香气组分含量差异,也不利于茉莉花茶产业升级和优化提升茉莉花品质的种植技术。因此,分析广西横县不同区域种植茉莉花的香气组分含量及土壤中的活性中微量元素含量,对茉莉花栽培技术优化及花茶加工产业的高质量发展具有重要意义。茉莉花香气组分是茉莉花品质的重要指标,主要在开花过程中形成和释放,主要受茉莉花品种、采摘时问和生长环境等因素影响。在现有报道中,茉莉花香气组分的采集方法主要有溶剂萃取、蒸馏萃取、超临界CO2萃取和固相微萃取法等,不同方法采集的香气组分及含量不同。许多研究表明,固相微萃取技术能萃取到大量且完整的茉莉花香气组分。杨文靖等研究发现,茉莉花的主要香气组分种类在晴天与雨天相同,但不同组分含量间存在差异,总体上晴天茉莉的香气评价指数更高,但雨天茉莉中的乙酸叶醇酯含量约为晴天茉莉的10倍。陈梅春等研究表明,茉莉鲜花的主要香气成分为乙酸苄酯和芳樟醇等,其中,单瓣茉莉中芳樟醇含量更高,双瓣茉莉中乙酸苄酯含量更高,香气品质评价结果以双瓣茉莉优于单瓣茉莉,且7月采摘的茉莉花香气评价指数高于8和9月,伏花品质高于其他时期的茉莉花。邓传远等开展不同发育过程单瓣茉莉花香气组分及含量分析,结果表明其大部分芳香成分含量在茉莉花微开期最高,花蕾成熟期和微开期检测到的香气化学成分种类最多。李鹤等对成熟期双瓣茉莉花花蕾进行离体香气组分分析发现,双瓣茉莉中共有94种香气成分,离体状态下可显著促进茉莉花释香。现有报道中对茉莉花离体或在位开花过程香气组分变化的研究较多,针对市场上商品茉莉花分级评价及香气组分差异的研究鲜见报道。通过分析广西横县不同种植区域商品茉莉花的主要香气组分,将商品茉莉花分级评价与其香气组分含量进行关联,并探究土壤的活性中微量元素含量对茉莉花香气组分的影响,为各地茉莉花种植技术改良和花茶窨制工艺水平提升提供参考依据。
试验点位于广西横县,地处桂东南,坐标为东经108。487~109。37’,北纬22。087~23。30’。全县土地总面积3476.8km2,茉莉花主要种植在该县有机质含量较高的东部地区横州、校椅、云表、马岭和那阳等乡镇,百合和莲塘镇也有少量种植。综合考量前期实地调研茉莉花种植情况及《横县耕地地力评价》中耕地质量分布数据,在横州、校椅、云表和马岭共选择8个采样点,在那阳、莲塘和百合分别选择1个采样点,共计11个采样点(分别为1~11号样点),采集茉莉花样品及其相应的种植土土样,各采样点土壤基础信息见表1,采样时间为2020年7月12-13日,此时接近伏花期,茉莉花整体品质较高。
在前期调研的基础上,选择11个茉莉花种植区域作为采样点,每个采样点分别采集两个地块的茉莉花样本和对应地块的土壤样本。茉莉花样本采集方法为:收集10~15朵达到商品茉莉花条件的花蕾(洁白、饱满),用锡纸包好并做好标记,立即置于液氮中保存。土壤样本采集方法为:去除表层土后,收集0~20C1TI土层的土壤,每个采样点按照S型分布选取5个点的土壤混匀作为一个土壤样本。
主要仪器设备:GC-MS仪(Agilent7890B,美国),质谱仪(Agilent5977B,美国),色谱柱为安捷伦DB-Wax(30.0m×250.00μm×0.25μm,美国)。试验所用2-辛醇(TCI公司,日本)为分析纯(纯度I≥99.5%)。
茉莉花香气组分采用气质联用检测挥发性组分方法进行检测。取300.0mg样本于20mL顶空瓶中,加入10μl10μg/mL2-辛醇为内标;使用自动固相微萃取头DVB/CAR/PDS,Stableflex(2cm)(Sigaaldrich公司,德国)进行挥发性组分萃取,萃取温度60℃,时问30min,解析时问4min。GC-MS分析条件:进样口温度250℃;柱温箱升温程序:起始温度40℃保持4min,以℃/min升温至245℃,保持5min;质谱条件:离子源温度230℃,四级杆温度150℃,电离电压-70eV,质量范围(m/z):20~400,扫描模式Scan。Qc样本为所有样本混合后制成。
土壤有效态铁和有效态锌含量采用HJ804.2016((土壤8种有效态元素的测定》中的二乙烯三胺五乙酸浸提-电感耦合等离子体发射光谱法进行测定,有效硼含量采用NY/T1121.8-2006((土壤检测第8部分:土壤有效硼的测定》中的甲亚胺比色法进行测定,交换性钙和交换性镁含量采用NY/T1121.13-2006《土壤检测第13部分:土壤交换性钙和镁的测定》中的原子吸收分光光度法进行测定。
采用ChromaTOFV4.3x(LECO)和NIST库对质谱数据进行峰提取、基线矫正、解卷积、峰积分、峰对齐和质谱匹配等。挥发性组分含量为相对含量,计算时以2-辛醇为内标,进行相对定量。定量方法为:以该样品中加入的内标为参照,内标在样本中的含量记为Cs,内标峰面积记为As,代谢物峰面积记为Ai,不同代谢物对内标的矫正系数为Bi,计算各代谢物的相对含量Gi。
公式(1)中,代谢物的相对含量Ci为目标代谢物与内标峰面积的比值,该相对含量值无量纲;公式(2)中增加了内标含量Cs和矫正系数Bi,但由于不同目标代谢物与内标的矫正系数Bi只能通过标准品检测后计算得到,故本文采用公式(1)计算和比较不同代谢物的相对含量。
试验数据采用SPSS25.0和Excel2016进行统计,以在线分析软件PCA进行主成分分析,相关性热图及回归分析采用GraphPadPrism8制图。
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夏季茉莉花的第一次为害高峰(7月下旬至8月下旬)时,性迷向和性诱杀处理对防花被害的平均效果分别为63.08%和77.45%,防有虫花的控制效果分别为66.65%和80.98%,2处理与农户自防处理无显著性差异(P<0.05)。采用性迷向和性诱杀处理技术后,茉莉花的质量增加了4.01%~4.14%,第二次为害高峰(9月初)时,防效最高的性诱杀处理对防花被害和防有虫花的防效分别为38.88%和42.60%,对秋季蛀花、蛀枝的防效分别为39.99%和40.84%,防效有所下降。
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