胶体粒子与蛋白质相互作用及其应用（三）

2.5 BLG-胶体粒子体系黏度测定

如图5所示，在胶体粒子A分散的BLG蛋白溶液体系中，BLG溶液黏度随蛋白浓度提高有极小上升趋势，可能是由于分子间的引力没有明显变化。而B与C胶体粒子分散的体系中，在蛋白浓度较低时黏度趋势不变，而随着蛋白浓度进一步提高，蛋白表观黏度也有微小上升趋势，可能是由于蛋白溶液分子内的氢键作用增强从而引起黏度的增加。用宏观流变的方法测得溶液的黏度如表4所示。通过比较宏观与微观的黏度值，发现胶体粒子C分散的溶液黏度与宏观测得的黏度差距最小，说明动态光散射利用胶体粒子所测得的黏度是真实有效的，其中胶体粒子C与BLG相互作用最弱，胶体粒子C更适宜微观测黏度。

2.6 BSA-胶体粒子体系黏度测定

图6显示随着蛋白浓度的提高，蛋白溶液黏度有所波动。胶体粒子B分散的体系中，随蛋白浓度的提高，蛋白溶液黏度有轻微上升趋势。胶体粒子C分散的体系中，同BLG一样，在较低浓度时蛋白溶液黏度没有随蛋白浓度提高而发生明显变化，而在蛋白浓度较高时，蛋白溶液黏度有轻微上升趋势。如表5所示，结合宏观测得的黏度进行显著性分析，可以看出pH7.4条件下，胶体粒子A，B，C均适宜测量BSA溶液黏度。

2.7 OVA-胶体粒子体系黏度测定

如图7所示，随着浓度的提高，OVA溶液黏度有所波动，整体趋于稳定，可能是由于蛋白浓度过低，蛋白分子间的氢键作用较弱导致黏度没有显著变化。结合表6，胶体粒子B微观测得的黏度与宏观无显著性差异。因此，通过DLS选择合适的胶体粒子微观测得的黏度值可以信赖。可能对微观测量结果造成偏差的主要原因有：1）颗粒团聚，本研究在试验前均将分散体系充分摇晃，但即便如此，也无法保证颗粒在分散体系中不会出现颗粒团聚现象。2）颗粒在待测液体样品中可能存在分布不均匀的情况，局部颗粒浓度过高可能会导致多重散射的现象。

3 结论

本文利用光散射技术监测蛋白-胶体粒子体系的相互作用，优化了一种有效的微观测定溶液黏度的方法，增加了研究蛋白分子构象及溶液性质的另一个维度。结果表明，胶体粒子的粒径和蛋白浓度均对粒子间的相互作用影响较小，而胶体粒子与蛋白质表面带电性质却显著影响分子间的相互作用，且对体系黏度测定也有较大影响。因此利用黏度测定的方法监测分子间的相互作用是可行的。此外，比较宏观与微观测得的黏度值，发现表面接有羧基的胶体粒子在测量溶液黏度时适用性较高。这也说明了DLS微观测得的黏度值是真实有效的，且DLS测量蛋白溶液黏度具有显著的优势。

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