响应面法优化槐米中芦丁的溶剂热法提取工艺（三）

（2）响应面回归模型的方差分析

为了检验回归方程的有效性，进一步确认各因素对芦丁提取率的影响，对回归模型进行了方差分析，结果见表3。

由表3可知，回归模型极其显著（P＜0.0001），说明建立的模型有意义；失拟项P=0.1367＞0.05，无显著性差异，说明模型拟合度良好。模型复合相关系数R²=0.9572，校正决定系数R²Adj为0.9173，说明响应值芦丁提取率实际值和预测值之间具有较好的拟合度，可以应用该回归模型对槐米中芦丁的提取效果进行分析和预测。各因素的F值可评价该因素对响应值的影响，F值越大，表明该因素的影响越显著。由表3可知，F（A）=84.44，F（B）=13.57，F（C）=18.86，F（D）=10.31，即各因素对槐米中芦丁提取率的影响顺序为乙醇体积分数＞提取温度＞提取时间＞液料比。

对乙醇体积分数、提取时间、提取温度以及液料比四因素，进行交互作用分析，如图6所示。响应面可以直观的反映各试验因素对响应值影响的大小。响应面的坡度越陡，说明响应值对该试验因素的改变越敏感；反之，坡度越缓，该因素对响应值的影响越不明显。响应面在底面的投影为等高线图，由等高线可得到各试验因素最优条件下的取值，等高线的形状反映了两两因素交互效应的强弱，圆形表示两因素交互影响不显著，而椭圆表示两因素交互影响显著。从图中可以看出，在检测范围内6个响应面图均为开口向下的凸形曲面，说明芦丁提取率存在极大值，6个图中的等高线中心均位于-2～2之间，说明提取的最优条件存在于所设计的因素水平范围之内。同时，从图6中可以看出，乙醇体积分数的响应面坡度最为陡峭，接下来依次是提取温度、提取时间、液料比，由此可知在考察的四个因素中芦丁提取率对乙醇体积分数最为敏感。由图6中两两交互影响的等高线图可知，乙醇体积分数和提取温度、乙醇体积分数和液料比、提取时间和液料比的等高线图呈明显的椭圆形，说明两两因素之间的交互作用对芦丁提取率的影响显著。通过DesignExpert软件分析，溶剂热法提取槐米中芦丁的最优参数为乙醇体积分数为60.67%，提取时间为33.12min，提取温度为72.15℃，液料比为102.7mL/g，在此条件下槐米中芦丁提取率的理论值为18.93%。

（3）验证试验

为了便于工艺操作，将最佳提取条件修正为：乙醇体积分数61%，提取时间33min，提取温度72℃，液料比为100mL/g，平行进行三次提取试验。结果表明，在此提取条件下，芦丁提取率的实测值为（19.07±0.46）%（n=3），与理论值18.93%相近。说明采用响应面法得到的溶剂热法提取条件，参数准确可靠，具有一定的参考价值。

4、对比试验

将溶剂热提取法与优选的乙醇回流法进行了对比，结果见表4。从表中可以看出，溶剂热法的提取率高于乙醇回流法且提取时间短，仅为乙醇回流法的20%左右，这主要是由于溶剂热法是在密闭的体系中进行的，提取过程中溶剂的自生压力提高了溶剂与药物细胞间的交换速率，有助于细胞壁的破裂，因此缩短了提取时间，提高了提取效率。

三、结论

采用溶剂热法提取槐米中的芦丁，并在单因素试验的基础上对该提取方法进行了响应面试验设计，考察了各影响因素的交互作用，得到了溶剂热法提取的最佳条件：乙醇体积分数61%，提取时间33min，提取温度72℃，液料比100mL/g。在此条件下，芦丁提取率为19.07±0.46%，与模型预测值相近。为芦丁的提取提供了理论基础，同时也为槐米的深加工提供了参考。

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