2.5 肝脏组织切片

肝脏是参与D-半乳糖代谢的主要器官，过量D半乳糖可增加活性氧（ROS）的产生，可能导致器官损伤。从图4a可以看出NC组小鼠的肝脏细胞结构具有正常的中心静脉和肝细胞，核大而圆；图4b显示DG组肝组织有大量脂肪泡蓄积，肝小叶结构不明显，说明肝脏出现异常。PC组和太子参醇提物干预各组肝组织情况较DG组好，胞质丰富，脂肪蓄积减少，肝小叶结构清晰，肝血窦以中央静脉为中心呈均匀的散状分布，肝组织形态得到不同程度的恢复，其中HPEs组肝组织情况与NC组接近，说明高剂量太子参醇提物对氧化应激造成的肝脏组织损伤修复效果好。

2.6 UPGMA 聚类分析

通过比较不同样品间Unifrac距离的远近来判断其微生物构成的相似性并聚类，从图5所示的聚类分析结果可以发现，除个别样品有重叠外，MPEs组和HPEs组明显成一簇，相似程度高，而DG组与NC组存在分离，说明NC组、DG组与MPEs和HPEs组微生物构成差异较大。

2.7 属水平群落组成热

从图6的上方进化树可以看到，NC、PC和LPEs组聚成一类，MPEs和HPEs组聚成一类，DG组单独聚成一类，表明DG组与各组小鼠肠道菌群结构在属水平上相似程度较低，说明注射D-半乳糖致损对小鼠肠道微生物属水平组成影响较大。在DG组中，甲基杆菌属（Methylobacterium）、阿尔法变形杆菌（UnclassifiedAlphaproteobacteria）、普雷沃氏菌属（Paraprevotella）、理研菌属（Rikenella）等为代表的潜在致病菌属含量增加。与DG组相比，HPEs组肠道微生物表现为上调的菌属有拟杆菌属（Parabacteroides）、梭菌属（Anaerotruncus）、另枝菌属（Alistipes）、粪芽孢菌属（Coprobacillus）、S24-7等菌属的丰度，其中Parabacteroides属SCFAs产生菌，可以产生戊酸，Anaerotruncus能编码表达合成丁酸盐所需要的酶，Alistipes可能具有预防和治疗如结肠直肠癌等肠道疾病的潜力，相对于其他肠道微生物具有更强的金属抗性，而S24-7属于丁酸盐产生菌。MPEs组上调Bifidobacterium、Bacteroides和Prabacteroides，其中Bacteroides为肠道优势厌氧菌，能帮助宿主分解多糖，与摄入党参能提高Bacteroides的研究结果类似。LPEs组盲肠微生物表现为上调Odoribacter、梭菌属（Clostridium）和普氏菌属（Prevotella）。Clostridium可以合成强抗氧化剂3-吲哚丙酸(色氨酸脱氨的产物)，消除D-半乳糖产生的自由基从而保护大脑免受氧化伤害；而Prevotella可提高SCFAs的合成速率，增强对组蛋白去乙酰化酶和G蛋白偶联受体的抑制作用并减少脑损伤。作为主要益生菌，双歧杆菌（Bifidobacterium）和乳杆菌（Lactobacillus）能改善健康人的总抗氧化状态并降低氧化应激指标。有报道人参中的多糖能够改善某些人参皂苷的肠道生物转化，同时改善肠道菌群的紊乱情况，特别是促进Lactobacillus和Bacteroides生长。本文也有类似试验结果，特别是与NC组相比，小鼠注射D-半乳糖后肠道Bifidobacterium和Lactobacillus相对丰度明显降低，喂食Vc以及高剂量太子参醇提物显著增加了Bifidobacterium和Lactobacillus的丰度。益生菌的代谢活动可通过清除氧化剂化合物或阻止其在肠道中的生成发挥抗氧化作用。

2.8 小肠组织切片

肠粘膜的完整性受损易使肠内微生物易位进入淋巴系统，更多有害的致病菌会粘附在肠道上皮，与Bifidobacterium和Lactobacillus等有益菌竞争。过量的ROS会减少肠道粘液层厚度，粘液松散会大大降低粘液屏障的保护作用。

Bifidobacterium和Lactobacillus均已被证明具有降低动物肠道内毒素水平和改善粘膜屏障功能。从图7小肠切片图可见，NC组小肠组织学形态呈正常状态，绒毛排列致密，肠绒毛结构完整；DG组绒毛排列较稀疏，绒毛顶部有萎缩现象，说明肠绒毛结构出现异常；PC组较DG组的粘膜损伤情况有所恢复，但绒毛呈短锥状，分支仍较少。随着太子参醇提物剂量的增加，粘膜损伤逐渐修复，图7f所示HPEs组小鼠小肠绒毛损伤情况明显恢复，致密程度恢复接近正常水平。

3 结论

本研究表明，太子参醇提物在一定程度上能增强D-半乳糖模型鼠的抗氧化能力。通过脏器指数、抗氧化酶活、肝脏组织形态、小肠微生物等指标进行评价，结果表明太子参醇提物能改善D-半乳糖模型鼠生长迟缓的情况，显著提高小鼠肝脏、肾脏和脑部的CAT、SOD和GSH-PX酶活，降低MDA含量，保护肝脏组织免受氧化损伤，小鼠体内总抗氧化能力提高。同时，该太子参醇提物能有效提高小肠内容物中Bifidobacterium、Lactobacillus、Bacteroides和Blautia相对丰度，降低Unclassified-Alphaproteobacteria、Rikenella属等相对丰度，盲肠绒毛致密程度恢复接近正常水平，肠道总体患病风险降低，使得机体总体抗氧化水平得到提高。

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