Fe（Ⅲ）-MR催化氧化褪色光度法测定H2O2（二）

（4）反应温度的影响

取H₂O₂标准溶液6.00mL（反应液浓度为CH₂O₂=1.2×10^-4mol/L），其他条件不变，仅改变反应温度，测定吸光度（图3）。

试验表明，反应在室温下即可发生（30℃下ΔA=0.174），但升高温度，褪色反应加快。反应速率受温度的影响分三段：30～40℃直线下降；40～50℃趋于稳定，表明H₂O₂完全反应；50～60℃又缓慢下降，这是因为酸性环境下高温促使甲基红与共存物乙醇发生了酯化反应，导致溶液颜色变浅。故褪色反应温度设定为40℃。
 

（5）反应时间的影响

取H₂O₂标准溶液6.00mL（反应液浓度为CH₂O₂=1.2×10^-4mol/L），其他条件不变，仅改变反应时间，测定吸光度。结果表明：在0～60min内，lnA与t有线性关系（图3内插图），显然H₂O₂催化褪色反应为一级反应，速率方程为：lnA=-0.5669-0.00817t（min），反应速率为0.00817min-1，反应60min后，吸光度基本达到恒定（图4）。故确定反应时间为60min。

三、工作曲线

取H₂O₂标准溶液0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00、3.50、4.00、4.50、5.00、5.50、6.00、6.50、7.00、7.50mL配制标准系列，浓度依次为0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.10、1.10、0.12、0.13、0.14、0.15mmol/L，按实验方法完成吸光度测定并绘制工作曲线（图5）。H₂O₂浓度在0～0.15mmol/L范围内与ΔA呈良好的线性关系，回归方程为：ΔA=0.003+2.628c（mmol/L），相关系数r=0.9967。按实验方法平行测定11次空白溶液得s=0.01，三倍的信噪比求得方法检测限为0.01mmol/L。

四、干扰实验

当H₂O₂浓度为0.1mmol/L时，设定相对误差不大于5%，除强氧化剂MnO₄^-、Cr₂O₇^2-有干扰之外，10倍的NH₄⁺、Zn²⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Al³⁺、Cu²⁺、CO₃^2-、SO₃²-、HCO₃^-均不影响测定。

五、样品分析实验

准确称取0.5g固体食品样品，于15mL离心管中，加入5mL乙腈/水（1∶1，v∶v）溶液，涡旋混匀，超声提取20min，9500r/min离心10min，保留上层清液。

3%医用过氧化氢消毒液稀释1000倍。

取雨水、合成水样、消毒液稀释液、腐竹和银耳处理液各5.00mL，按试验方法测定过氧化氢，平行六次，计算平均值，并完成加标回收试验（表1）。精密度检验RSD=4.84%～5.00%，符合光分析要求，加标回收率在95.40%～103.5%范围内，说明共存物质不影响过氧化氢测定。

分别采用光度法和碘量法对消毒液过氧化氢含量测定，计算原样品百分含量和标准偏差S（表2）。完成两种方法的显著性检验（t检验）。

由两种方法标准偏差S求得合并标准偏差Sc=0.7034g/L，t=0.0739，查表得t_0.05，₁₀=2.228，即t＜t_0.05，₁₀，故两种分析结果的均值无显著性差异。由上述检验说明方法的精密度较高，系统误差小，因此甲基红褪色光度法可代替碘量法用于消毒液过氧化氢分析。
 

六、结论

Fe（Ⅲ）-MR催化氧化褪色光度法测定H₂O₂，干扰少，准确度高；在甲基红最大吸收波长处，H₂O₂浓度与吸光度变化值有线性关系，相关系数r＞0.99。方法用于银耳、腐竹、雨水及消毒液H₂O₂分析，结果满意。

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