四、模拟比色阶的制做

在植物组织速测方法中，多数用比色法，这就需要有比色标准色阶，如每次测定都现作标准，就比较麻烦，为了方便，在速测中常以模拟色阶作为比色标准。模拟色阶的制作方法很多。如用彩色印制的或人工绘成的比色卡，用相对稳定的有色溶液配制，用透明胶片或涤纶薄膜染制以及用塑料或有机玻璃加染料配制等等。不同材料制做的模拟比色阶各有其优缺点。现将有色溶液，透明胶片和有机玻璃模拟比色阶的制作方法简介如下。

1、有色溶液模拟标准色阶的制做

利用某种色调稳定的染料(或颜料)按系列标准模拟配制。

（1）配方甲所需试剂

硼砂溶液:1g硼砂(Na₂B₄O₇·10H₂O)溶于100mL蒸馏水中。

溴百里酚兰:0.10g溴百里酚兰溶于100 mL60%乙醇中。

甲基红:0.10g甲基红溶于100 mL60%乙醇中。

酚酞：0.l0g酚酞溶于100 mL60%乙醇中。

中性品红(或酸性品红):0.10g中性品红溶于100mL60%乙醇中。

稀盐酸溶液:2mL浓盐酸用蒸馏水稀释至100mL。

硫酸钡(或干净的石英砂粉)。

依上述配方，模拟出的各级色阶与相应的标准色阶(见标准溶液配制)比较，如有偏差。则可用增减配方中某种试剂用量来调整，直至与相应的标准一致。

（2）配方乙所需试剂

酸性兰BGA溶液:0.1g酸性兰BGA溶于100mL蒸馏水中。

酸性太红G：O.1g酸性太红G溶于100 mL蒸馏水中。

硫酸钡或干净石英砂粉。

依上述西方，模拟出的各级色阶与相应的标准色阶比较，如有偏差，则可用增减配方中某种试剂用量来调整，直调至与相应的标准一致。

2、透明胶片模拟标准色阶的制做

利用透明胶片在有色溶液中浸染出来的色调制成类似标准色阶。透明胶片可用幻灯片（幻灯制片厂的边角料亦可）。

制备无机磷、硝态氮、氨基酸氮模拟以标准色阶所需溶液：

用上述各种试剂组成一定比例的染色液，取一小片胶片浸入染色液，经数秒至数分钟取出，用滤纸吸干水分，卷成一圈（硝态氮模拟色阶要加衬一层半透明的塑料薄膜）装入试管（规格与标准色阶一致）与相应的标准色阶比较，可色调有偏差，即可增减上述配方中某种试剂用量来调整，如胶片染色深浅有出入，可增减胶片浸染时间或改变染色液的浓度来调整。

3、有机玻璃模拟标准色阶的制作

有机玻璃模拟标准色阶使用的初原料为生单体，它的学名是甲基丙烯酸甲酯，这是一种无色透明的液体。向生单体中加入0.03%～0.06%的偶氮二异丁睛后，在特定条件下便反应生成熟单体(又叫半聚体)。按照不同的染色目的，向熟单体中加入不同染色溶液进行调色，然后在一定的温度下进行反应，半聚体便变成了聚合体，同时呈现不同等级的颜色。

制备无机磷、硝态氮、氨基酸氮模拟色阶的各种溶液。

酸性兰BGA染色溶液:称0.1g酸性兰BGA染料，先溶于2 mL正丁醇中，用玻棒充分搅拌后，加2mL生单体再搅拌，然后加21mL生单休拌匀，将此溶液在50⁰C～80℃水浴上加热30 min，再加77mL生单体混合均匀。

浓耐晒黄染色溶液:称0.1g耐晒黄染料，溶于100L生单体中。

稀释的耐晒黄染色溶液:吸取上述浓耐晒黄染色溶液5 mL，用生单体稀释至40 mL。

参考资料：土壤农业化学分析方法