北方伟业计量集团有限公司
20%血清(FBS)、10%DMSO、70%1640培养液;或90%血清(FBS)、10%DMSO,更可防止细胞内冰晶形成。将DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占总体积的10%,然后滤膜过滤后分装保存备用。
注意事项:
1.DMSO 不用高压灭菌;DMEM不能高温高压灭菌,可以过滤除菌。
2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存。
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。
DMSO在冻存液中的作用: DMSO在4℃时对细胞无明显毒性,分子量小、溶解度大、易透过细胞膜,降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度,使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩;DMSO与水分子结合,可使冰点下降,减少细胞内冰晶的形成,从而减少冰晶损伤。
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