1. 菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出来活化的话属于第几代？

答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代了，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形式繁殖了一次就算是传了一代。但如果仅是物理位置的转移没有繁殖就不是传代，需要注意。

2. 菌株传代保存到瓷珠里一定要挑单菌落吗？

答：不一定非挑单菌落，但是一定要挑相同特征的菌落，就是说从同一个菌落纯化出来的，以保证它们的特性完全一致。原则是尽量多挑，宁多勿少。

3. 菌株冷冻保存是-70℃还是-80℃有具体标准规定么？

答：其实是有标准的，《SN/T 2632-2010 微生物菌株常规保藏技术规程》是关于菌株保藏的一个标准，大家可以学习一下，各个保存方式都有介绍，但是瓷珠是比较新兴的保存方式暂时里面还没有收录。

4. 怎样延长质控菌株的保存时间呢？

答：大量的实验证明质控菌株在低温、干燥、缺氧、缺营养的条件下保存效果是最好的，越接近这种保存条件，菌株的保存时间越长。

5. 怎样纯化质控菌株？

答：纯化就是从TSA上或别的非选择性平板上转挑取单菌落划线再分离出单菌落，这就相当于纯化了。

6. 我们只保存第一代菌株是不是要重新传代保存呢，认证老师会不会认为这是个错误？

答：应该不会，认证老师不会提出这种问题的，不过最好是第一代菌株保存一些、第二代菌株保存一些，使用时工作菌株最好使用第三代菌株，第一代菌株可作为长期保存用。

7. 为何要将第三代作为工作菌株？

答：多传代几次后菌株的活力会明显提高，但最多传代到第五代后就不能用了，因为第五代后菌株虽然不会完全变异，但变异率会明显增加，因此选用第三代作为工作菌株是比较合适的，若使用第一、第二代菌株活力没有那么强。

8. 质控菌株是不是传代超过五代就必须销毁处理？

答：不一定。传代超过五代只是存在菌种变异可能，但如果传代到第六代、第七代……，经过形态、生化特性、DNA特征等验证，性状保持稳定，那么这些五代后的菌还是可以正常使用。

9. 菌种编号意义？

答：以金黄色葡萄球菌CMCC（B）26003为例CMCC为中国医学菌种保藏中心缩写，其它常见菌种保藏中心还包括ATCC（美国标准菌种收藏所）、CICC（工业微生物菌种保藏中心）、FSCC（食品安全菌种保藏中心）；B的意思是细菌，对应还有F（真菌）；26003为CMCC的保藏编号。

10. 同样是金黄色葡萄球菌，ATCC6538与ATCC25923有什么不同？

表明其来源不同，生化特性有也有所不同。比如ATCC6538溶血能力较ATCC25923要强。

11：菌株常见形态：冻干粉，斜面，菌液，北呐应该出了一个菌片，有什么不同：冻干粉买回去用复苏液复苏之后再使用，斜面和菌液买回去直接使用，但是斜面和菌液有效期比冻干粉短，后台北呐一个菌种名称对应好多编号，售价不同刚好呼应第9条，0代菌种进价不一样，所以对应售价肯定不一样，用起来是太大区别，呼应第10条。菌株都是活的，大部分菌株保藏，都是处在一个休眠状态，活性最低的一个状态。