蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件研究（三）

（3）pH对红花籽粕水解度的影响

在酶用量为2.9%、超声时间为10min、超声温度为55℃的条件下，分别测pH为6、6.5、7、7.5、8的情况下水解1h，其水解度和还原力结果如图6、图7所示。

由图6、图7可知，随着pH的升高，红花籽粕的水解度和还原力出现先升高，后下降的趋势，并且在pH为6.5时，其水解度和还原力最大。这可能与红花籽粕中含有的蛋白的性质有关。因此，选择6.5为合适pH。

（4）酶用量对红花籽粕水解度的影响

在超声时间为10min、pH7.0、超声温度为55℃的条件下，分别测酶用量为0.9%、1.9%、2.9%、3.9%、4.9%的情况下水解1h，其水解度和还原力结果如图8、图9所示。

由图8可知，随着酶用量的增加水解度增大，其中在酶用量为2.9%时水解度最大，图9可知，随着酶用量的增大，还原力增大，其中在酶用量为1.9%，还原力最大，其后开始下降，在酶用量2.9%时有下降趋势，但是不明显。综合考虑水解度、还原力和节约成本因素，认为1.9%为最合适酶用量。

4、正交试验

由表4正交试验的结果表明，通过极差分析表明影响水解度的因素为：pH＞超声时间＞超声温度＞酶用量，影响还原力的因素为：pH＞酶用量＞超声温度＞超声时间，综合分析来看，最佳的工艺条件为超声时间10min，超声温度65℃，pH6.5，酶用量1.9%。

5、验证试验

根据单因素实验和正交试验结果，综合考虑酶的成本，选定在超声时间10min，超声温度65℃，pH6.5，酶用量1.9%条件下进行验证实验，三次平行试验，试验结果表明水解度为51.1%，还原力的吸光度值为0.428。与正交试验中所得的值较为接近，证明正交试验得到红花籽粕的酶解工艺是可行的。

三、结果与讨论

本试验先是用木瓜蛋白酶、枯草芽孢杆菌中性蛋白酶、胰蛋白酶对红花籽粕的酶解进行研究，试验结果证明，在55℃条件下用超声波处理10min促进了酶的分解，提高了蛋白酶的活力，其中木瓜蛋白酶酶解最快，所以选取木瓜蛋白酶进行工艺研究。

木瓜蛋白酶酶解红花籽粕的工艺研究结果表明，通过单因素试验和正交试验优化提取条件，结果表明影响木瓜蛋白酶的主次因素为pH＞超声温度＞超声时间＞酶用量。综合考虑酶解液的水解度、还原力和成本等因素确定最佳提取条件为：超声时间10min，超声温度65℃，pH6.5，酶用量1.9%，在此条件下，水解度为51.1%，还原力的吸光度值为0.428。

本试验在研究蛋白酶酶解红花籽粕的工艺条件的同时，加入了超声波辅助水解的研究因素，实验过程中超声和水解是同步进行的，通过试验结果表明，加入超声因素进行水解大大提高了所使用的酶的酶活，在节约成本的同时，大大提高了红花籽粕的水解度和还原力。

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