2.3 基质效应

液相色谱质谱联用技术中，基质效应(增强或抑制)是普遍存在的。以不含目标分析物的样品作为空白基质，按照优化好的方法对三种基质进行前处理并获得空白基质溶液，分别在空白基质溶液和配制溶液中加入同等浓度(10 ng/mL)的混合标准溶液，将各目标分析物在空白基质溶液中的峰面积与配制溶液中的峰面积进行比较，基质效应大于100%代表基质增强，反之，代表基质抑制。如图3所示，13种目标分析物在膏霜剂型、液体剂型、凝胶剂型中基质效应分别为60.7%～152.8%、57.7%～188.0%和71.2%～159.6%。

其中喹诺酮类抗生素(氧氟沙星和诺氟沙星)基质增强效应最为明显，在三种基质中均大于141.1%，诺氟沙星在液体剂型中基质效应最高，达到188.0%。除强力霉素和头孢拉定外，其余11种物质在三种基质中均表现为基质增强效应或基质抑制效应，且受基质的影响较为接近。本实验进一步比较了不同氯化钠加入量(0.05、0.15和0.3 g)对各目标物基质效应的影响，如图4所示，随着氯化钠用量的增加，各目标物质的总体基质效应影响略有减小，进一步将氯化钠用量增至0.3 g，各目标物质的基质效应并没有得到明显的改变，因此，在处理液体剂型样品时选用0.15 g氯化钠进行试验。

2.4 方法学数据

实验采用同位素内标校正法进行定量，不仅克服基质效应的影响，同时消除前处理过程中目标物损失造成的影响。其中，四环素、金霉素以四环素-D6为内标，土霉素以土霉素-13C22-15N2为内标，米诺环素以米诺环素-D6为内标，强力霉素以强力霉素-D3为内标，红霉素以红霉素13C-D3为内标，头孢拉定以头孢氨苄-D5为内标，磺胺嘧啶以磺胺嘧啶-D6为内标，氧氟沙星、诺氟沙星以左氧氟沙星-D8为内标、克林霉素以噻菌灵-D4为内标，甲硝唑以甲硝唑-D4为内标，氯霉素以氯霉素-D5。如表4所示，各目标物质在三种基质中的回收率经同位素内标校正后，多在100%±10%范围内，较好的避免了基质效应对定量结果的影响(图3)。

13种目标物质的方法检出限、定量限、线性相关系数见表3，加标实验结果见表4。各目标物在3种剂型消毒产品中的方法学数据良好，13种选定的抗生素方法检出限在2～25 μg/kg之间，满足消毒产品中抗生素违法添加的检测要求。以未检出目标分析物的样品作为空白样品，根据各目标物质的定量限，进行低、中、高三个浓度水平加标实验，其中红霉素、氧氟沙星、克林霉素加标水平为15、50和250 μg/kg，四环素、土霉素、磺胺嘧啶、诺氟沙星、甲硝唑、氯霉素加标水平为45、100和250 μg/kg，金霉素、米诺环素、强力霉素、头孢拉定加标水平为75、250和500 μg/kg，每个浓度水平平行测定6次，各物质低、中、高3个浓度加标水平的回收率为71.2%～130.4%，相对标准偏差均小于11.3%。

2.5 实际样品检测结果

运用建立好的方法，对液体剂型、凝胶剂型、膏霜剂型消毒产品中的13种目标物质进行检测，在一份膏霜剂型的消毒产品中检测出氧氟沙星(图5)，含量为21.1 mg/kg，其余样品中均未检出相关物质。

3 结论

本法基于超高液相色谱质谱联用技术，建立了适用于液体剂型、膏霜剂型和凝胶剂型类消毒产品中8类13种抗生素的检测需求，该方法简单、可靠、重现性好，覆盖的抗生素种类多且针对性强，可用于打击消毒产品中违法添加抗生素的行为。

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