2 结果

2.1 流动相的选择

实验比较了不同水相及有机相作为流动相时各目标物的响应。首先，以0.1%甲酸水作为水相，分别比较了甲醇和乙腈作为有机相时各目标物的响应情况。结果表明，当有机相使用甲醇时，氯霉素、强力霉素、金霉素的响应有所提高，且峰形有所改善，但其余目标物质响应均有所下降，且米诺环素的峰形变差。其次，以0.1%甲酸水作为水相，进一步比较了有机相酸度的影响，有机相分别为乙腈和0.1%甲酸乙腈溶液。结果表明，当使用0.1%甲酸乙腈溶液时，磺胺嘧啶、克林霉素、米诺环素响应略有提高，诺氟沙星和强力霉素的响应有所降低，其余目标物质基本无影响。

最后，以乙腈作为有机相，比较了纯水、0.05%甲酸水、0.1%甲酸水作为水相时各目标物质的响应情况。结果表明，随着酸度的增加，氯霉素、红霉素、磺胺嘧啶、头孢拉定的响应呈下降趋势；氧氟沙星、诺氟沙星、金霉素、土霉素、四环素、强力霉素的峰形变好，响应变强；克林霉素的峰形变好，强度基本不变；米诺环素和强力霉素在使用纯水或0.05%甲酸水作为水相时不出峰。综上所述，由于本方法所检测的13种目标物质中，除氯霉素为负离子模式外，其余12种目标物质均为正离子模式，而通常情况下酸能增强正离子模式下目标物质的响应，抑制负离子模式下目标物质的响应，通过以上实验发现，酸的增加抑制了氯霉素的响应但能满足实验需求，而如果水相中酸的含量低于0.1%，强力霉素和米诺环素不出峰，综合考虑下，本方法选取了0.1%甲酸水-乙腈作为流动相，各目标物的整体响应和分离良好。抗生素及其同位素内标的标准色谱图见图1和图2。

1：四环素-D6；2：土霉素-13C22-15N2；3：米诺环素-D6；4：强力霉素-D3；5：磺胺嘧啶-D6； 6：头孢氨苄-D5；7：左氧氟沙星-D8；8：红霉素-13C-D3；9：噻菌灵-D4；10：甲硝唑-D4；11：氯霉素-D5

2.2 样品前处理条件的选择

研究分别比较了3 mL甲醇、甲醇+水(1∶1，V/V)、甲醇+0.1 mol/L盐酸(1∶1，V/V)提取效率，发现甲醇+0.1 mol/L盐酸(1∶1，V/V)对于氯霉素的提取效率较差，这主要是由于氯霉素采用负离子模式采集，而酸抑制了负离子的响应，最终导致氯霉素回收率较低；当采用甲醇+水(1∶1，V/V)提取膏霜剂消毒产品中的抗生素时，提取液呈乳浊状，经微孔滤膜过滤后仍无法澄清；另外，由于液体剂型类消毒产品中的水能与甲醇互溶，这会导致水溶性的杂质随目标物质一起被提取出来，因此加入适量的氯化钠，有助于水相与甲醇相分层，从而使目标物质保留在甲醇相中，一些水溶性的目标物则留在水相中，从而达到去除部分水溶性杂质的目的。然而对于凝胶类消毒产品，以上提取模式均不适用，这主要基于凝胶的特殊性质，既不溶解于甲醇也不溶于水，因此进一步比较了乙腈、乙腈+水(1∶1，V/V)的提取效率，发现乙腈能使凝胶类消毒产品变性沉淀，同时能提取目标物质，而乙腈+水(1∶1，V/V)体系则使得凝胶类消毒产品呈“浆糊状”，无法分离提取目标物。

针对3种剂型的消毒产品，分别采用1、3和5 mL溶剂进行提取，结果发现，使用1 mL溶剂提取时，由于提取溶剂过少，提取不充分，进一步增加提取溶剂的用量(3和5 mL)，各目标物质回收率均能满足试验要求，由于使用5 mL溶剂提取时，受稀释效应的影响，各目标物质的方法定量限高于使用3 mL提取溶剂，因此，本实验采用3 mL溶剂提取目标分析物。综上所述，最终确定了液体剂型、膏霜剂型、凝胶剂型不同的前处理方式，详见1.2.2。

声明：本文所用图片、文字来源《卫生研究》，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除

相关链接：强力霉素，红霉素，氯霉素