气相色谱法测定婴幼儿食品和乳品中脂肪酸

       引言：脂肪作为人体的三大供能营养素之一，对人体有许多重要的生理作用。油脂中 90% 以上是脂肪酸，而脂肪酸又分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。多不 饱和脂肪酸中含有的 n-6 和 n-3 脂肪酸属必需脂肪酸，是人体无法合成而必须从食物中获取 的。

      婴儿体格、智力和行为的发育除了受先天因素和早期教育的影响外，还与后天的营养状 况有很大关系。日本营养学专家饭野节夫的研究结果表明，儿童的脑力发展 80%以上取决于 营养。而在众多营养素中，脂肪酸与智力发育有密切关系是受到学术界肯定的。中国农业大 学食品学院营养与食品安全系系主任何计国副教授说：“在注意膳食脂肪合理摄入量的同时， 必须考虑各种脂肪酸的搭配。适宜比例的脂肪酸摄入，能降低患肥胖、心血管疾病的危险性， 并促进胎儿、婴幼儿大脑和视觉的发育。”因此，婴幼儿食品中脂肪酸的组成引起人们的重 视，卫生部于 2010 年发布食品安全国家标准《GB 5413.27-2010 婴幼儿食品和乳品中脂肪 酸的测定》[1]，规定了脂肪酸的检测方法，本方法依据该标准方法中第一法用气相色谱法对 婴幼儿食品和乳品中的脂肪酸进行了测定。

实验部分

       主要仪器设备与试剂：仪器：气相色谱仪，Trace 1310，美国 ThermoFisher。试剂： 碳酸钠溶液，准确称取 6 g 无水碳酸钠，加水溶解并定容至 100 mL；甲苯，色谱纯；乙酰 氯甲醇溶液：量取 40 mL 甲醇于 100 mL 干燥的烧杯中，准确吸取 5.0 mL 乙酰氯逐滴缓慢 加入，不断搅拌，冷却后转移并定容至 50 mL 干燥的容量瓶中；脂肪酸甲酯混合标准溶液， 100 mg/L。

       气相色谱条件：色谱柱 TR-FAME,100m,0.25mm,0.20μm(P/N:260M238P,S/N:0036515)； 柱温采用程序升温条件如下：60℃(保持 1min)；20℃/min 到 160℃，保持 2min，4℃/min 到 240℃(保持 15min)。载气为高纯氮气(纯度 99.999%)；流速 1.0mL/min。进样口为 SSL 进样口，温度：260℃，进样模式 split，分流比，10:1。检测器温度：280℃，氢气 35mL/min， 空气 350mL/min，尾吹气氮气 40mL/min。

样品前处理方法

       称取 0.5g 待测样品于 15mL 干燥螺口玻璃管中，加入 5.0mL 甲苯，加入 10%乙酰氯甲醇 溶液 6.0mL，旋紧螺旋盖，振荡混合后于 80℃±1℃水浴中放置 2h，期间每隔 20min 取出振 摇一次，水浴后取出冷却至室温。将反应后的样液转移至 50 mL 离心管中，分别用 3.0 mL碳酸钠溶液清洗玻璃管三次，合并碳酸钠溶液于 50 mL 离心管中，混匀，5000 转/分钟离心 约 5 min。取上清液作为试液，气相色谱仪测定

样品的测定

      上述衍生后的样品中，分析物浓度范围较宽，样品直接进样、稀释 10 倍、100 倍后分 别进样，各组分分别以适合稀释倍数的样品进行定量。用 Thermo Scientific 全新一代的 Trace1310 气相色谱仪配 FID 检测器进行检测。样品中衍生得到的脂肪酸甲酯可以用保留时 间进行定性分析，峰面积进行外标法定量。