云南松针精油的提取及抗氧化活性研究与应用（三）

2.4 云南松针精油的理化性质

由表5可知，云南松针精油的相对密度、折光度和旋光度均符合GB/T14455-2008标准要求。

2.5 云南松针精油的抗氧化活性

2.5.1 云南松针精油对ABTS⁺·的清除能力

由图6得知，云南松针精油对ABTS⁺自由基的清除率随精油浓度的增大而逐渐增强，当精油浓度低于20.40mg/mL时，松针精油对ABTS⁺自由基的清除率均低于同等浓度的维生素C。但精油浓度为20.40mg/mL时，清除率可达95.62％，与相同浓度的维生素C清除能力相当。由此表明，云南松针精油在高浓度时对ABTS⁺·有较好的抗氧化能力。经过SPSS22.0分析，云南松针精油对ABTS⁺·的半数清除率IC₅₀为4.027mg/mL。

2.5.2 云南松针精油对DPPH·的清除能力

由图7可知，当精油浓度为3.19～25.50mg/mL时，对DPPH·清除率随浓度增加而缓慢增大，当精油浓度从25.50mg/mL继续增加时，对DPPH·清除率迅速增加，当增加到102.20mg/mL时，对DPPH·清除率达到85.32%，但云南松针精油对DPPH·清除率均比维生素C低很多。经过SPSS22.0分析，云南松针精油对DPPH·的半数清除率IC₅₀为47.294mg/mL。

2.5.3 云南松针精油对OH·的清除能力

2.5.3.1 云南松针精油对OH·的清除能力-结晶紫法

由图8得知，云南松针精油和维生素C对OH·的清除率均随浓度的增加而增大，且云南松针精油的增强趋势和维生素C相似，当浓度达到20.40mg/mL时，云南松针精油对OH·的清除率可达89.90％，相同浓度的维生素C对OH·的清除率为97.76%。经过SPSS22.0分析，云南松针精油对OH·的半数清除率IC50为2.492mg/mL，而维生素C的IC₅₀为1.204mg/mL，可见，在相同条件下云南松针精油和维生素C对OH·的清除能力无明显差异。

2.5.3.2 云南松针精油对OH·的清除能力-水杨酸法

由图9得知，云南松针精油对OH·的清除能力随浓度的增大而增强，当浓度为0.64～10.20mg/mL时，松针精油和维生素C对OH·的清除率的增加趋势均不明显，当浓度继续从10.20mg/mL增加时，松针精油和维生素C对OH·的清除率急剧上升，精油浓度为20.40mg/mL清除率可达92.68％，而同等浓度维生素C对OH·的清除率为95.96%。经过SPSS22.0分析，云南松针精油对OH·的半数清除率IC₅₀为0.078mg/mL，而维生素C的IC₅₀为0.29mg/mL，可见，在相同条件下云南松针精油和维生素C对OH·的清除能力无明显差异。

2.5.4 云南松针精油对Fe³⁺的还原能力

体系中含有还原性物质时，K₃［Fe（CN）₆会被还原为K₄［Fe（CN）₆］，而在酸性条件下K₄［Fe（CN）₆］能与FeCl₃反应生产普鲁士蓝，普鲁士蓝在700nm处有特征吸收，故吸光度值越大，说明体系中的样品还原能力越强。由图10可知，吸光度随松针精油的浓度增加而增大，由此表明精油对Fe³⁺还原能力随浓度的增加而增强。相同条件下，维生素C对Fe³⁺还原能力比松针精油强很多。

2 结论

（1）本文以云南松的松针为原料，共水法提取松针精油。以出油率为指标，考察NaCl用量、料液比、提取时间和浸泡时间4个因素对出油率的影响，通过单因素正交试验优化得到共水法提取云南松针精油的最优工艺为NaCl用量为8%，料液比为1:7g/mL，提取时间为4h，浸泡时间为2h，出油率为1.33%，且NaCl用量为和料液比对出油率有显著影响，而提取时间和浸泡时间对出油率影响不显著。

（2）通过GC-MS分析，共水法提取的松针精油共鉴定出15种化合物，较水蒸气蒸馏法提取的挥发油成分单一，单萜和倍半萜类化合物，其中α-蒎烯含量高达64.23%，因此共水法提取松针精油在医药应用领域有一定的优势，且共水法提取的精油的折光度、相对密度、旋光度均符合国家标准要求。（3）云南松针精油具有良好的抗氧化性能，且松针精油的浓度与自由基的清除率之间存在较明显的量效关系。松针精油对ABTS⁺·、DPPH·、OH·（结晶紫法）、OH·（水杨酸法）的半数清除率IC₅₀值分别为4.027、47.294、2.492、0.078mg/mL，其中对OH·的清除能力与维生素C无显著差异。而松针精油对Fe³⁺的还原能力较维生素C的差，且存在显著差异。

（3）云南松科植物资源丰富，本文通过优化了共水法提取松针精油的工艺，并测定该方法获得的松针精油的理化性质和主要挥发性成分，考察其抗氧化活性，为云南松针精油在食品、医药、化工等领域的开发利用提供理论依据。

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