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由图1可看出,当NaCl含量为0~6%时,松针精油的出油率不断上升,NaCl含量为6%时,出油率达到最大(1.02%),当NaCl的质量分数大于6%时,精油出油率开始下降,这可能是因为松针精油提取中加入NaCl后,会使精油在水中的溶解度有所下降,让原来溶解在水中的那部分精油被蒸出来,所以出油率会有所提高,但是继续增加NaCl用量易引起爆沸,使精油中易挥发成分损失增加,同时体系的蒸汽压降低,使精油的相对挥发速率降低,造成出油率下降,因此选择NaCl用量为6%。
由图2可知,料液比为1:3~1:6g/mL时,松针精油的出油率随着料液比的增加而增大,当料液比为1:6g/mL时,松针精油出油率达到最大(1.13%)。继续增加料液比时,出油率开始下降,这是因为在共水蒸馏提取松针精油的过程中,如果蒸馏水的用量太小,样品没有得到充分浸泡,加热过程中蒸馏水蒸发很快,使油不能完全蒸出,影响出油率。但是随着料液比的增加,精油在水中的溶解度也会随之增大,使出油率降低,同时增加能耗和蒸馏时间,因此料液比应控制在1:6g/mL。
如图3所示,提取时间不同,精油出油率有显著差异,1~3h内,松针精油的出油率随着提取时间的增加而增大,且增大的趋势大,提取时间为3h时,出油率达到最大(1.20%)。提取时间超过3h后,出油率随着提取时间的加长而减小。可能的原因是在共水蒸馏前期,松针精油还未与溶剂充分作用,随着蒸馏时间的延长,精油逐渐被蒸出,出油率增加,但继续延长蒸馏时间,较长时间的加热,精油不稳定易分解,从而出油率继而降低。因此提取时间为3h为宜。
由图4可看出,当浸泡时间在0~2h时,松针精油的出油率随着浸泡时间的延长而不断提高,浸泡时间为2h时出油率达到最高(1.08%)。浸泡时间超过2h后,出油率随着浸泡时间的延长而明显下降。共水蒸馏前浸泡会使松针组织细胞膨胀,细胞间隙变大,加快内外细胞液的动态交换,从而有利于挥发性成分的蒸出。但浸泡时间过长,松针中的多糖、果胶等成分溶出而产生乳化作用,从而抑制了松针中挥发性成分的溶出,出油率也随之下降。因此浸泡时间为2h为宜。
从表2可以看出,各单因素对松针出油率影响的大小顺序为A>B>C>D,即NaCl用量>料液比>提取时间>浸泡时间。根据K值,可知云南松针精油的最佳提取工艺为A3B3C3D2,即NaCl用量为8%,料液比为1:7g/mL,提取时间为4h,浸泡时间为2h。在此条件下进行3次验证试验,出油率平均值为1.33%。方差分析结果表明:NaCl用量为和料液比对出油率有显著影响(P<0.05),而提取时间和浸泡时间对出油率影响不显著(P>0.05)。
王琳等、杨燕等、田玉红等均采用水蒸气蒸馏法从云南松鲜松针叶中提取挥发油,分别鉴定出45、50、55个组分,其中α-蒎烯的含量分别为14.74%、组分除了含有单萜和倍半萜类化合物外,还含有部分醇类、酸类、芳香族化合物,醛,酮和酯类化合物等。由图5和表4可知,本实验采用共水法提取的云南松针精油中共鉴定出15种化合物,占总挥发油的99%,主要化学成分为单萜和倍半萜类化合物,其中α-蒎烯(64.23%)、β蒎烯(10.66%)、α-水芹烯(7.61%)、(+)-香橙烯(5.29%)、β-毕澄茄烯(3.45%)、樟脑萜4.141%、22.542%,其(2.62%)、(-)-柠檬烯(2.27%),占总含量的96.13%。由此可见,采用共水法蒸馏提取的云南松针精油的挥发性成分相对水蒸气蒸馏法提取的挥发油成分单一,仅为单萜和倍半萜类化合物,且含有相对较高的α-蒎烯。α-蒎烯有明显的镇咳和祛痰作用,并有抗真菌作用,因此共水法提取松针精油在医药应用领域有一定的优势。
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采用Box-Behnken响应面法对超声波辅助水蒸气蒸馏提取丁香精油进行优化。选用超声波功率、料液比、颗粒度、萃取时间为考察因素,以丁香精油的提取率为检验指标进行单因素试验,采用Box-Behnken响应面试验设计法优化考察四因素三水平及其交互作用对丁香精油提取率的影响。
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