高效液相色谱-蒸发光散射检测法检测三氯蔗糖及其相关物质的含量（二）

3.1.2 梯度洗脱比例条件设定

根据3.1.1中三氯蔗糖及其相关物质的极性与甲醇-水的选择性差异，设定表1和图3中梯度洗脱比例及流速。

3.1.3 标准曲线绘制

根据以上浓度的三氯蔗糖样品得到其相应峰面积（图4），并计算其双对数，得到结果如表2：

根据表2中的数据得到图5的标准曲线。

3.2 含量检测

选取杂质含量较高样品称量0.0379g，甲醇-水溶液定容至17.8933g，稀释比例为472.1187倍。按照2.2.1中样品配置方法检测计算得到表3中的组成成分浓度。

3.3物质定性

图6、图7分别为含有不同氯原子分子的分子离子峰模拟质谱图细节和对应的实际检测结果。

8为实际生产中的母液HPLC谱图和经TOF-MS确认后各个峰对应的物质。以下表4是三氯蔗糖及其相关物质代号、物质名称、出峰时间及质荷比情况。

4 结论

本文章通过高效液相色谱-蒸发光散射检测仪选取了合适的甲醇-水流动相，设定了有效的梯度洗脱比，得到了一条R2=0.9996的两元一次标准曲线y=0.7364x-5.0742，并用三氯蔗糖样品进行测试，样品纯度为99.21%，所得物质总浓度为100.14%，原因猜测为本标准曲线选择峰面积量程区间较大，此误差在可接受范围之内。

此外，通过质谱信息基本确定物质的在此方法下的显峰顺序及物质种类，为以后的三氯蔗糖及其相关物质分析奠定了基础，也为将来进一步提高三氯蔗糖质量铺垫了道路。

文章体现了一种用高效液相色谱仪-蒸发光散射检测仪分析三氯蔗糖及其相关产物的分析方法，利用此分析方法可以较好的分离各种不同的副产物。根据检测器的信号强度的理论，物质浓度与检测器信号强度应该遵守双对数线性关系。本方法使用三氯蔗糖为标准纯物质，还可用蔗糖、三氯蔗糖-6-酯测试一系列不同标准物质浓度样品，建立起物质浓度和HPLC峰面积之间的定量对应关系。

此外，此方法不仅用于固体三氯蔗糖的检测还可用于液体产物的检测。利用物质浓度和HPLC峰面积之间的定量对应关系，将GB25531中相关物质检测方法可更加准确。

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