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a一半乳糖苷酶(a—galactosidase,a—ga1)是催化0c一半乳糖苷键水解的一种外切糖苷酶,因能分解蜜二糖,又称蜜二糖酶,它能催化a一半乳糖苷键的水解。这一特点使得它可用于改善和消除饲料及豆制食品中的抗营养成分。此外,它在医学领域中能实现B—O血型转变、制备通用型血,以及在法布里病的酶替代治疗中也发挥了重要作用。
a一半乳糖苷酶还可作用于含一半乳糖苷键的复合多糖、糖蛋白和鞘糖脂(Katrolia等,2012;Svastits—DicsO等,2009)。某些a一半乳糖苷酶在底物浓度高度富集的情况下还具有转半乳糖基作用,利用这一特点可用于低聚糖的合成及制备环糊精衍生物(Zhao等,2008)。开发嗜中性或具pH稳定性的一半乳糖苷酶,寻找高产酶量的微生物或植物,成为近几年的研究热点。许多耐热a一半乳糖苷酶也因其特殊性逐渐引起了科学家们的广泛兴趣,期望利用其热稳定性在工业方面发挥更大的利用价值,以及在科技工艺和医药领域显示出更广阔的应用前景。
a一半乳糖苷酶广泛存在于植物、微生物及动物中,属于糖苷水解酶第26和37家族。其中,第26家族的一半乳糖苷酶只来源于真核生物,而第37家族的a一半乳糖苷酶则主要来源于原核生物。根据酶活和最适pH,a一半乳糖苷酶有酸性和碱性之分。对于植物来源的a一半乳糖苷酶的研究比较多,在植物种子、果实、叶子和块茎中都发现了该酶,且来源于种子和叶子的多是酸性a一半乳糖苷酶,属于糖苷水解酶第27家族。碱性a一半乳糖苷酶多具有合成酶作用,且属于糖苷水解酶第36家族(daSilvaFi—alho等,2008)。
植物中研究的a-半乳糖苷酶有咖啡豆、无花果、豆芽、椰子、芋头块茎、黄瓜、葡萄、水稻、木瓜等;种子中有大豆、斑豆、蕃茄等;细菌中有链霉菌、脆弱芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、发酵乳杆菌、嗜热丝袍菌、双歧杆菌等;真菌中有葡酒色被孢霉、根霉、产紫青霉、里氏木霉、烟曲霉、草酸青霉、寄生曲霉、黑曲霉、臭曲霉、分枝犁头霉、米曲霉等。在各种哺乳动物组织的匀浆中也存在一半乳糖苷酶,人和鼠的甲状腺、肾脏和脾脏酶的活性最高。Beutler等(1972)首次研究了a一半乳糖苷酶的动力学和热力学稳定性,使人们对a一半乳糖苷酶的特性有了更深一步地了解。
随着分离纯化技术的发展,得到了越来越多的纯化酶,分子生物学的迅速发展也为a一半乳糖苷酶的研究开创了新的领域。通过基因工程技术,人们已经从动物器官、植物、细菌和真菌等生物体中克隆出许多a一半乳糖苷酶基因,许多a一半乳糖苷酶也因其耐热性而受到越来越多的关注。Fridjonson等(1990)克隆了来源于布氏栖热菌(ThermusbrockianusITI360)的d一半乳糖苷酶基因,该酶能耐受的最高温度达93℃;Gote等(2006)从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearother—mophilusNCIM一5146)分离纯化一半乳糖苷酶的最适温度为65℃。已研究较多的是具有热稳定性的a一半乳糖苷酶菌株和嗜热菌(Thermusthermophi—lus)、耐热梭状芽孢杆菌(Clostridiumstercorari—um)等(Olafur等,2002;Suryani,2003)。这些从嗜热或耐热微生物中获得的热稳定a一半乳糖苷酶可解决其应用过程中存在的热不稳定性问题,对该酶的推广和使用具有重要意义。
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