奶粉中香兰素和乙基香兰素的气相色谱-质谱法分析测定

奶粉中香兰素和乙基香兰素的气相色谱-质谱法分析测定

1、适用范围

      本方法适用于奶粉中香兰素和乙基香兰素的定性定量分析。

2、原理

     奶粉中的香兰素和乙基香兰素用二氯甲烷提取、分散固相萃取方法净化后，采用气相色谱一质谱选择离子方式检测，外标法定量。

3、仪器与试剂

（1）仪器：气相色谱-质谱仪配有自动进样器和电子轰击源(EI)；分析天平；涡旋混匀器；超声波清洗器；高速离心机；氮吹浓缩仪。

（2）试剂：所有试剂除另有说明外，均为分析纯；试验中所用水均为二次蒸馏水；二氯甲烷(色谱纯)；C18固体吸附剂；氯化钠；无水硫酸钠，于550℃灼烧4h，储存于干燥器中，冷却后备用。

（3）标准品：香兰素、乙基香兰素。

①混合标准储备溶液配制：分别称取香兰素和乙基香兰素标准品100mg于100mL容量瓶中，用二氯甲烷溶解并定容至刻度，得到1000μg/mL混合标准储备溶液，冰箱中备用。

②混合标准使用液配制：取10mL标准储备溶液于100mL容量瓶中，用二氯甲烷定容至刻度，得到100μg/mL混合标准使用液。 香兰素和乙基香兰素混合标准系列：分别取用混合标准使用液0.05mL、0.1mL、0.5mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL，以二氯甲烷稀释至10mL，得到0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL标准系列。

4、分析步骤

(1)样品处理：准确称取样品5g(精确至0.01g)于100mL容量瓶中，加水约25mL，超声混匀5min，使其成为均匀奶液，加水定容至刻度，摇匀。用移液管移取5mL奶液于15mL离心管中，加入2g氯化钠，5mL二氯甲烷，盖好盖子振荡提取5min，静置5min，10000r/min离心5min，小心全部取出下层有机层，过无水硫酸钠后，定容至5mL，加入150mg C18固体吸附剂，涡旋1min，静置2min吸取上清液过0.2μm滤膜，待气相色谱-质谱分析。

相同仪器条件进行标准系列气相色谱-质谱分析。

(2)样品测定

①气相色谱参考条件：色谱柱，DB-35MS石英毛细管色谱柱或相当者(30m×O.25 mm×O.25μm)；色谱柱升温程序，初始温度100℃，保持3min，以20℃/min升温至250℃，保持5min；进样口温度250℃；传输线温度250℃；载气，高纯氦气，恒流模式，流速为1.OmL/min；进样模式，不分流进样；进样体积1.OμL；溶剂延迟8min。