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液相用水的要求

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毛绪寰 2021-07-09 15:02 评论( 0 ) 浏览( 1998 )

一、液相用水的干扰因素

1、颗粒

颗粒磨损泵,尤其是密封圈和柱塞杆。针对进样器颗粒也会形成磨损。此外颗粒会堵塞色谱柱和管路,引起压力增大。颗粒还可能会呈现为另一种固相,会改变样品的组分。

2、有机物

超纯水中的有机物会干扰色谱峰的分离度,会引起鬼峰存在、还会改变固定相的选择性以及干扰色谱基线。

3、离子

离子浓度改变会影响分离结果,部分能吸收UV的离子会对峰形成影响。某些有腐蚀性离子的还可能会降低高压输液泵等配件的使用寿命。

4、胶体

胶体会不可逆的粘附在固定相上边,影响柱的分离效果。

5、微生物

微生物会堵塞色谱柱,其代谢生成物会增加有机物,颗粒等污染物。

二、液相用水的分类——瓶装水和蒸馏水

因为瓶装纯净水和蒸馏水均仅是一般的纯水而不是超纯水,水中仍具有少量的离子和有机物等其它杂物,加以配制液相和洗脱液除了会污堵昂贵的色谱柱,也干扰HPLC定出平坦的基线。

瓶装纯净水的纯化工艺,一般说来包括粘附、过滤、反渗透等,对颗粒性有机物的去除效果良好,但对微量离子及有机物的去除却不能够满足高灵敏度的HPLC实验之需求,还有就是,因为其包装一般说来多见于PVC瓶,透氧率高,并且存在一定的化学溶出量,故而污染瓶中的纯净水,尤其是保存一段时间后,水质下降更多,因此呈现在HPLC色谱图上,虽无特定吸收峰,但基线存在较严重的不稳干扰。

蒸馏水是指用蒸馏方法制备的纯水。可分一次和多次蒸馏水。水经过一次蒸馏,不挥发的组分残留在容器中被除去,挥发的组分进入蒸馏水的初始馏分中,一般说来只收集馏分的中间部分,约占60%,要得到更纯的水,可在一次蒸馏水中加进碱性高锰酸钾溶液,除去有机物和二氧化碳;加进非挥发性的酸(硫酸或磷酸),使氨成为不挥发的铵盐。经过对双蒸水展开HPLC检测时得知,254nm和214nm在22-27分钟时都存在较强的吸收峰,这显示有疏水性较强的有机物污染,其缘由应是蒸馏过程的共沸现象引起了某些挥发性有机物去除不彻底。

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