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关于老师提问液相色谱柱使用缓冲盐或缓冲溶液后如何冲洗系统的回答

沈磊-会员头像-www.bzwz.com伟业计量
沈磊 2021-02-19 15:16 评论( 0 ) 浏览( 4265 )

液相色谱使用缓冲盐和缓冲溶液流动相后都是需要冲洗系统的,常规的C18色谱柱一般使用10%甲醇水(乙腈水)冲洗,再用纯有机相(甲醇或者乙腈)冲洗色谱柱及整个系统即可,如果冲洗后需要更换色谱柱,建议再过渡为85%左右有机相,这样色谱柱中溶剂挥发速度不是那么快。

有的老师疑问,是不是使用纯水冲洗也可以,其实这个需要依据色谱柱而定,一般情况下个人习惯先使用10%甲醇水冲洗系统,再使用纯乙腈冲洗系统,最后过渡为85%左右乙腈。之所以选择使用乙腈,一是因为乙腈的洗脱能力比甲醇好,更能够将色谱柱中强保留组分洗出,二是乙腈黏度低,整个系统保持较低的压力。缺点就是乙腈价格贵,毒性大。如果色谱柱耐水型的,如AQ色谱柱,也可以使用纯水相冲洗,但如果不确定色谱柱耐水性能,建议优先选择用高比例水相冲洗,再过渡为纯有机相,最终保存在85%左右有机相。

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