邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（di-2-ethylhexylphthalate,DEHP）作为一种典型增塑剂被广泛应用于食品包装材料、容器、儿童玩具、医疗用品、化妆品及人造革等。近年的研究表明.DEHP及其代谢产物具有明显的生殖和发育毒性，可在妊娠早期干扰着床过程、造成胚胎丢失，并在妊娠中晚期影响胎盘及胎儿发育,但是目前尚没有公认有效的防治方法。第五批全国老中医药专家学术经验继承工作指导老师傅萍教授总结了四十余年的临床经验,根据预培其损的治则提出了经验方预培汤，该方由黄茂、党参、熟地、山药、茯苓、白术、当归、白芍、川茸、甘草组成，有培本益元、抗毒安胎的功效。

临床上傅萍教授常以预培其损法治疗各种滑胎患者，疗效显著同。本研究以DEHP暴露妊娠大鼠模型为研究对象，观察预培汤干预对大鼠胚胎发育及胎盘组织学改变的影响，并基于胎盘组织总抗氧化能力（totalantioxidantcapacity,TAOC）、超氧化物歧化酶（superoxidedismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSHPx）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）等指标，探讨预培汤可能的作用机制。

1材料和方法

1.1实验动物

SPF级70d龄健康未生育雌性SD大鼠36只，体质量230~260g；性成熟雄性SD大鼠36只，体质量3OO~35Og,均购于上海西普尔-必凯实验动物有限公司［实验动物生产许可证号:SCXK（沪）2018-0006］,均饲养于浙江中医药大学动物实验中心［实验动物使用许可证号:SYXK（浙）2018-0012］,饲养温度20~25七，相对湿度40%~60%,自由饮食和进水。

1.2染毒物质及药物

DEHP（分析纯，浓度M99.5%）购于美国Sigma公司（批号：20180105）；玉米油（试剂级）购于杭州昊鑫生物科技有限公司（批号：20180108）。预培汤处方:黄茂15g,党参15g,熟地12g,淮山药12g,白术9g,茯苓12g,当归9g,白芍9g,川茸9g,甘草5g。所有药物均由杭州市中医院中药房提供,制备成含生药4.4g-mL-'的溶液。在开始正式实验前，选择l.lg-mL\2.2g-mL-\4.4g-mL-'分别作为低、中、高剂量组进行了预实验，结果提示，低、中剂量组与模型组比较，各指标无统计学差异，故将4.4gml/作为预培汤煎液的最终浓度进行正式实验。中药灌胃等效剂量换算参考文献中的人与动物体表面积折算比率表。

1.3主要试剂和仪器

T-AOC检测试剂盒、GSH-Px检测试剂盒、SOD检测试剂盒、CAT检测试剂盒、ROS检测试剂盒及MDA检测试剂盒均购于南京建成生物研究所（批号：20190220、20190126、20190124、20190413、20190421、20190108）；苏木精-伊红（hematoxylin-eosinstaining,HE）染液购于北京Solarbio公司（批号:G1120）。RM2016切片机和EG1150包埋机购于德国莱卡公司；BX51T-PHD-J11显微镜为日本奥林巴斯公司产品；GL*00SD超声波细胞破碎仪购于南京先欧仪器制造有限公司；5810R型台式高速冷冻离心机购于德国Eppendorf公司:FiltermaxF5多功能酶标仪购于奥地利MolecularDevices公司。

1.4实验动物分组及处理

将36只雌性SD大鼠随机分为对照组、模型组、预培汤组，每组12只，与雄性SD大鼠同笼（雌雄比例1:1）,次日&00检查有无阴道栓，如发现阴道栓则提示妊娠，将当天记录为妊娠0d,以此推算妊娠日期。从妊娠0d开始，对照组每日上午予玉米油lOmL-kg-1灌胃，下午予0.9%氯化钠溶液lOmL-kg-1灌胃；模型组每日上午予DEHP500mgkg"灌胃，下午予0.9%氯化钠溶液10mL-kg-'灌胃；预培汤组每日上午予DEHP500mg-kg-'灌胃，下午予预培汤煎液lOmL-kg-'灌胃，各组均持续灌胃至妊娠18do给药期间每日称量大鼠体质量，并根据体质量调整用药剂量，至妊娠第19天处死孕鼠，剖腹取出胎鼠，称量胎鼠质量，记录各组孕鼠妊娠胎数以及其中的活胎数、死胎数、明显外观畸形胎数；并记录各组胎盘外观、色泽、体质量。取约0.2g胎盘组织，以PBS冲洗干净,4%甲醛固定24h后石蜡包埋，连续切片行病理学检测；另取约0.2g胎盘组织，以液氮快速冷却后，-80乜超低温冰箱保存，用于氧化应激指标检测.