玉米赤霉烯酮检测

参考资料：食品卫生微生物检验标准手册    

玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)是由禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、尖孢镰刀菌、黄色镰刀菌(F．culmorum)、串珠镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰刀菌、雪腐镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物。ZEN的化学命名为6-(10羟基-6氧基-+-1-碳烯基)p雷锁酸-内酯[6-(10-hydroxy-6-OXO—trans-1-undecenyl)β-resorcylic acid lactone]。化学结构式如下：

ZEN是白色结晶化合物，溶于碱性水溶液、乙醚、苯、乙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯，不溶于水。    

ZEN主要污染玉米、小麦、大麦、燕麦、小米、芝麻、干草和青贮饲料等。猪和牛等家畜摄食被ZEN污染的谷物和饲料后，可引起动物的雌性激素中毒症，主要症状有阴道和乳腺肿胀，子宫肿大、外翻、严重情况下脱垂。ZEN能使怀孕的母猪流产，雄性小猪出现睾丸萎缩、乳腺肿大等雌性化影响。目前ZEN的测定方法有薄层色谱法、气相色谱法、高压液相色谱法等。AOAC已将Shot well等经过协作研究的玉米中玉米赤霉烯酮的测定方法定为标准方法。该方法是用三氯甲烷提取样品中的ZEN，提取液经硅胶柱净化，再经己烷和乙腈液一液分配，最后经薄层层析后用目视法测定。本章介绍的薄层色谱法参考了Mirocha和AOAC法，省去了乙腈和柱净化步骤，使方法简便，不需要特殊仪器和试剂，易于在基层推广应用。

一、薄层色谱法    

(一)适用范围    

本方法适用于小麦及其制品和玉米及其制品中ZEN的测定。    

(二)原理    

样品中的ZEN经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层展开后，ZEN在短波紫外光下显蓝绿色荧光，在薄层色谱板上与标准比较测定含量。    

(三)试剂    

以下试剂除特殊规定外均为分析纯试剂。    

1、乙酸乙酯；      

2、三氯甲烷；    

3、甲苯；    

4、甲酸；    

5、甲醇；    

6、无水乙醇；    

7、1mol/L氢氧化钠溶液；    

8、2mol/L磷酸溶液；    

9、4mol/L磷酸溶液；

10、丙酮；    

11、无水硫酸钠；    

12、20％三氯化铝-乙醇溶液：称取20g三氯化铝(AICl3·6H20)，溶于100mL乙醇中，过滤，室温保存。        

13、硅胶G：薄层色谱用；    

14、ZEN标准溶液：精密称取3mgZEN，加无水乙醇溶解，转入100mL容量瓶中，加无水乙醇至刻度，此标准溶液含ZENO.03mg/mL。吸取此标准溶液1mL，用无水乙醇稀释至10mL，此溶液每毫升含ZEN 3μg，将此标准溶液置4℃备用。    

(四)仪器

(1)薄层板的制备：3g硅胶G，加7～8mL蒸馏水，研磨至糊状后，立即倒入涂布器中，推成5cm×20cm的薄层板三块，置室温干燥后，在1050C活化1h，取出放干燥器中备用。    

(2)展开剂：三氯甲烷-甲醇(95+5)15mL或甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6+3+1)15mL，任选一种。