液相色谱-串联质谱同时测定食用植物油中的多种真菌毒素（二）

发布时间：2021-10-28 22:37 编辑者：特邀作者周世红

2 结果与讨论

2.1 真菌毒素的分离优化

本研究通过洗脱梯度优化结合串接质谱MRM模式。可有效避免复杂基质对真菌毒素检测的干扰，并获得最优的分离效率。通过对离子化条件、离子对的筛选以及各毒素目标物的碎裂能和去簇电压进行优化(如表1所示)，以期获得最优灵敏度。结合28种真菌毒素目标物的结构性质差异，分别使用正、负电离模式，其MRM谱图如图1和图2所示。

2.2 方法学验证

2.2.1 方法的线性关系、检出限、定量

取空白食用油样品，按照1.2节中方法进行前处理，制备空白基质提取液。向空白基质提取液中加入适量的混合标准液配制标准工作液。按照1.3节中的条件进行测定。以各毒素目标物的质量浓度(x)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标，绘制工作曲线。分别计算各毒素在3倍信噪比和10倍信噪比响应时对应的质量浓度，确定方法对于各目标物的检出限(LOD)和定量限(LOQ)，结果见表2。从结果可以看出，各毒素目标物在其对应的质量浓度范围内线性关系良好。相关系数均大于0.999，线性范围满足风险监控的需求。

2.2.2 方法回收率及精密度

为有效避免食用油基质对真菌毒素提取效率的影响，综合考虑28种真菌毒素的极性差异，采用分步提取法，使用不同有机相比例的提取液进行提取。首先使用乙腈/水/甲酸(V乙腈:V水:V甲酸=80:20:0.1)对非极性目标化合物(如黄曲霉毒素等)进行提取。第2步使用乙腈/水/甲酸(V乙腈:V水:V甲酸=20:80:0.1)，对极性较大的化合物(如伏马毒素等)进行提取。合并提取液以提高各毒素目标物的提取效率。

图3对比了80％乙腈(2％甲酸)单一溶剂提取和分步提取方法对于伏马毒素回收率的影响。试验结果显示，分步提取法对伏马毒素回收率具有明显的提升。